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重组Pol D DNA聚合酶的纯化及其功能初步研究
引用本文:张雪松,李德凤,薛姜珊,陈孜孟,李卓,蒙健宗.重组Pol D DNA聚合酶的纯化及其功能初步研究[J].广西科学,2022,29(6):1086-1093.
作者姓名:张雪松  李德凤  薛姜珊  陈孜孟  李卓  蒙健宗
作者单位:广西大学生命科学与技术学院, 广西南宁 530005;自然资源部第三海洋研究所, 福建厦门 361000;广西农业职业技术大学食品药品研究院, 广西南宁 530007
基金项目:十三五海洋经济创新发展示范项目(海洋工具酶的开发与产业化子课题)资助。
摘    要:为研究古菌Pol D DNA聚合酶两个亚基的功能及其相互作用,对重组超嗜热硫还原古菌Thermococcus sp.4557 Pol D DNA聚合酶小亚基DP1和大亚基DP2进行柱层析纯化,采用荧光标记核酸结合聚丙烯酰胺凝胶电泳实验对两个亚基体外功能进行研究。结果表明,DP2具有DNA复制延伸活性,DP1具有3''→5''外切核酸酶活性;DP1在与DP2的浓度比高于0.3∶1时可降解DP2的延伸产物;DP2对DP1的外切核酸酶活性有促进作用,Sld5和Psf1蛋白复合体(Sld5 and Psf1 Complex,GINS 51)对DP1的外切核酸酶活性有抑制作用。古菌Pol D DNA聚合酶大小亚基的功能及其相互作用对DNA复制机制的进一步认识有借鉴意义。

关 键 词:古菌  Pol  D  DNA聚合酶  亚基  延伸活性  外切酶活性
收稿时间:2021/2/23 0:00:00
修稿时间:2021/3/26 0:00:00

Primary Study on Purification and Function of Recombinant Pol D DNA Polymerase
ZHANG Xuesong,LI Defeng,XUE Jiangshan,CHEN Zimeng,LI Zhuo,MENG Jianzong.Primary Study on Purification and Function of Recombinant Pol D DNA Polymerase[J].Guangxi Sciences,2022,29(6):1086-1093.
Authors:ZHANG Xuesong  LI Defeng  XUE Jiangshan  CHEN Zimeng  LI Zhuo  MENG Jianzong
Abstract:
Keywords:Archaea  Pol D DNA  polymerase  subunit  extension  activity  exonuclease  activity
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