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苛求芽孢杆菌胞外尿酸酶的表征及其在血清尿酸测定中的应用
引用本文:赵运胜,赵利娜,杨根庆,陶佳,卜友泉,廖飞.苛求芽孢杆菌胞外尿酸酶的表征及其在血清尿酸测定中的应用[J].华中科技大学学报(医学版),2007,36(2):239-242.
作者姓名:赵运胜  赵利娜  杨根庆  陶佳  卜友泉  廖飞
作者单位:1. 重庆医科大学重庆市生物化学与分子药理学重点实验室,生物信息学与分子工程研究室,重庆,400016
2. 重庆医科大学重庆市生物化学与分子药理学重点实验室,生物信息学与分子工程研究室,重庆,400016;重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室,重庆,400016
3. 重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室,重庆,400016
摘    要:目的考察苛求芽孢杆菌(ATCC 26904)分泌型尿酸酶的特性和将其应用于直接动力学尿酸酶法测定血清尿酸的有效性。方法苛求芽孢杆菌分泌的尿酸酶经DEAE-cellulose层析纯化后,用于以积分法分析尿酸酶反应曲线预测反应体系本底的直接动力学尿酸酶法测定血清尿酸。结果苛求芽孢杆菌分泌的尿酸酶只含1种肽链,分子量为34.7 kD(1kD=0.992 1 ku),其米氏常数为(0.22±0.01)mmo1/L(n=11),黄嘌呤抑制常数为(36±3)μmo1/L(n=4)。用此尿酸酶,只要被分析反应曲线终点的底物浓度低于起点的30%,应用积分法就能可靠预测本底;直接测定反应前吸收,可使直接动力学尿酸酶法不受常见血清成分、酶活性变化和15μmo1/L黄嘌呤等干扰。监测0.025 U/ml尿酸酶反应5 min的数据,其线性响应范围为1~50μmol/L;所得临床标本血清尿酸含量(Ck)与过氧化物酶偶联间接终点平衡法(Ce)正相关(Ck=-0.008 1.046Ce,r=0.996,n=206),但Bland-Altman法分析表明两种方法不一致。结论苛求芽孢杆菌分泌的尿酸酶可用于直接动力学尿酸酶法测定尿酸,并可保障其优势。

关 键 词:直接动力学尿酸酶法  血清尿酸测定  苛求芽孢杆菌分泌型尿酸酶
修稿时间:2005年11月25

Characterization of an Extracellular Uricase from Bacillus fastidious and Its Application in Direct Kinetic Assay of Serum Uric Acid
Zhao Yunsheng,Zhao Lina,Yang Genqing, et al Laboratory of Bioinformatics and Molecular Engineering Chongqing Key Laboratory of Biochemistry & Molecular Pharmacology.Characterization of an Extracellular Uricase from Bacillus fastidious and Its Application in Direct Kinetic Assay of Serum Uric Acid[J].Journal of Huazhong University of Science and Technology(Health Sciences),2007,36(2):239-242.
Authors:Zhao Yunsheng  Zhao Lina  Yang Genqing  Laboratory of Bioinformatics and Molecular Engineering Chongqing Key Laboratory of Biochemistry & Molecular Pharmacology
Affiliation:Zhao Yunsheng1,Zhao Lina1,Yang Genqing1,2 et al 1Laboratory of Bioinformatics and Molecular Engineering Chongqing Key Laboratory of Biochemistry & Molecular Pharmacology,2Department of Biochemistry and Molecular Biology,Basic Medical College,Chongqing Medical University,Chongqing 400016
Abstract:
Keywords:direct kinetic uricase method  serum uric acid assay  Bacillus fastidious extracellular uricase
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