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葡萄A病毒四川分离物的外壳蛋白基因克隆与原核表达
引用本文:王建辉,刘晓,席德慧,袁澍,蒋彧,杨辉,杜俊波,张中伟,陈克玲,林宏辉.葡萄A病毒四川分离物的外壳蛋白基因克隆与原核表达[J].园艺学报,2008,35(7):967-972.
作者姓名:王建辉  刘晓  席德慧  袁澍  蒋彧  杨辉  杜俊波  张中伟  陈克玲  林宏辉
作者单位:(生物资源和生态环境教育部重点实验室,四川大学生命科学学院,成都 610064;四川省农业科学院园艺研究所, 成都610066)
基金项目:教育部跨世纪优秀人才培养计划,高等学校博士学科点专项科研项目,四川省科技攻关项目,四川省应用基础研究计划,四川大学校科研和教改项目
摘    要:葡萄A病毒(Grapevine Virus A,GVA)是葡萄病毒属(Vitivirus)的典型种,在世界葡萄产区广泛分布。采集10株“藤稔”葡萄成熟枝条,使用6种葡萄病毒ELISA试剂盒检测发现10个样本中有6个感染4种不同的葡萄病毒。以GVA的ELISA阳性植株为材料进行RT-PCR扩增,首次获得了GVA四川分离物SL10的完整外壳蛋白基因(CP)。该基因全长597 bp,将其与GeneBank收录的15个GVA分离物的CP序列进行比对和构建系统进化树。把不同地理起源的GVA分离物分成2个变异组;其中Ⅰ组包括3个分离物(与Ⅱ组的其他分离物只有75.9%~80.1%的序列同一性);其余的13个分离物组成Ⅱ组(组内分离物具有84.4%~99.5%的序列同一性)。构建了GVA CP的原核表达质粒PET-30-GVAcp并转化BL21菌株,经IPTG诱导,目的基因得到了大量表达。

关 键 词:葡萄A病毒  ELISA  RT-PCR  外壳蛋白基因  原核表达  
收稿时间:2008-1-14
修稿时间:2008-5-9

Cloning and Prokaryotic Expression of CP Gene of Grapevine virus A Sichuan Isolate
WANG Jian-hui,LIU Xiao,XI De-hui,YUAN Shu,JIANG Yu,YANG Hui,DU Jun-bo,ZHANG Zhong-wei,CHEN Ke-ling,LIN Hong-hui.Cloning and Prokaryotic Expression of CP Gene of Grapevine virus A Sichuan Isolate[J].Acta Horticulturae Sinica,2008,35(7):967-972.
Authors:WANG Jian-hui  LIU Xiao  XI De-hui  YUAN Shu  JIANG Yu  YANG Hui  DU Jun-bo  ZHANG Zhong-wei  CHEN Ke-ling  LIN Hong-hui
Affiliation:[;1.Key Laboratory of Bio-resources and Eco-environment (Ministry of Education), College of Life Sciences, Sichuan University, Chengdu 610064, China;2.Horticulture Institute, Sichuan Academy of Agriculture and Science, Chengdu 610066, China]
Abstract:
Keywords:ELISA  RT-PCR
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