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人内皮抑素基因的克隆与表达及其抑瘤作用的实验研究
引用本文:章翔,吴景文,费舟,傅洛安,高大宽,屈延.人内皮抑素基因的克隆与表达及其抑瘤作用的实验研究[J].中华医学杂志,2001,81(13):783-787.
作者姓名:章翔  吴景文  费舟  傅洛安  高大宽  屈延
作者单位:第四军医大学西京医院全军神经外科研究所,
基金项目:国家自然科学基金资助项目 (39970854)
摘    要:目的 克隆人内皮抑素基因,检测其表达蛋白的生物学活性,应用该蛋白治疗裸鼠皮下人脑胶质瘤。方法 从人肝组织提取mRNA,用反转录聚合酶链反应技术克隆人内皮抑素基因,将其重组人pUC19,双氰末端终止法测定其核苷酸序列。构建非融合表达载体pDH-endo,使其在DH5α内经温度诱导表达,纯化该表达蛋白并用鸡胚绒毛膜尿囊膜实验和内皮细胞抑制实验检测其活性。经荷瘤裸鼠皮下注射该蛋白治疗人脑胶质瘤。结果 成功获得551bp的人内皮抑素基因,测序正确。该诱导表达蛋白分子量为20000,具有抑制血管生成活性。该蛋白每天5、10或20mg/kg裸鼠皮下注射可抑制荷瘤裸鼠皮下人脑胶质瘤血管生成和肿瘤生长(抑瘤率分别为34.5%,76.1%和80.2%)。结论 人内皮抑素基因和表达和初步应用,为采用抗血管生成方法治疗脑胶质瘤等实体瘤研究奠定了实验基础。

关 键 词:内皮抑素  基因  分子克隆  抑瘤作用  实验研究  脑胶质瘤
修稿时间:2001年1月4日

Research of cloning, expression of human endostatin gene and its inhibition effects to the glioma in vivo
Abstract:
Keywords:Endostatin  Gene  Clong  molecular
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