中成药坤宁安调控围绝经期大鼠卵巢颗粒细胞凋亡因子Bcl-2 mRNA表达的特点

目的:观察中成药坤宁安对围绝经期大鼠卵巢颗粒细胞凋亡的影响。方法:实验于2004年在黑龙江中医药大学完成。选用13～15个月龄雌性Wistaer大鼠50只,经阴道脱落细胞涂片检查,呈现出无动情周期确定为围绝经期鼠。随机分为5组,围绝经期模型组、坤宁安高剂量组,坤宁安低剂量组、替勃龙对照组、更年康对照组,每组10只。另选5月龄雌性Wistar大鼠10只作为青年对照组。围绝经期模型组给予生理盐水2mL,坤宁安高剂量组给予1.96g/kg坤宁安混悬液穴组成为柴胡、桂枝、龙骨、牡蛎、白芍、当归等雪;坤宁安低剂量组给予0.49g/kg坤宁安混悬液;替勃龙对照组给予0.136mg/kg替勃龙混悬液;更年康对照组给予0.15g/kg更年康混悬液;青年对照组给予生理盐水2mL,灌胃1次/d。灌胃4周后,断头处死,剖取大鼠卵巢,即供原位杂交法检测Bcl-2mRNA的表达。卵巢颗粒细胞凋亡因子Bcl-2mRNA阳性评定标准:根据切片卵巢组织中卵泡内颗粒细胞免疫组织化学染色的深浅分4级,未被染色的为阴性表达,深棕色为弱阳性表达,棕黄色为中度阳性表达,棕褐色为强阳性表达。为统计方便,予以半定量计分:1,2,3,4分别对应阴性表达,弱阳性表达,中度阳性表达,强阳性表达。每张切片至少观察3个视野。结果:实验过程中,围绝经期模型组、更年康对照组各有1只大鼠死亡。其余大鼠均存活直至实验结束。青年对照组大鼠卵巢颗粒细胞Bcl-2mRNA呈强阳性表达,围绝经期模型组大鼠卵巢颗粒细胞Bcl-2mRNA呈弱阳性表达,青年对照组与之相比差异有极显著性意义(P<0.01)。坤宁安高、低剂量组、替勃龙对照组大鼠卵巢颗粒细胞均有不同程度的Bcl-2mRNA阳性表达,与围绝经期模型组大鼠比较差异均有极显著性意义(P<0.01),更年康对照组大鼠卵巢颗粒细胞Bcl-2mRNA蛋白表达呈弱阳性,与围绝经期模型组比较差异有显著性意义(P<0.05)。结论:围绝经期大鼠卵巢颗粒细胞凋亡与Bcl-2mRNA的阳性表达呈负相关,坤宁安通过调控大鼠卵巢颗粒细胞Bcl-2mRNA的表达,达到延缓卵巢颗粒细胞凋亡的目的。

Effect of kun ning an on regulation of apoptotic factor Bcl-2 mRNA expression in ovary granule cells of peri-menopause rats