| 用构建的新型BmNPV载体在家蚕高效表达人β-干扰素 |
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| 引用本文： | 邓继先,王少飞,杨琴,卢建申,程萱,李琳,周耐明,肖成祖.用构建的新型BmNPV载体在家蚕高效表达人β-干扰素[J].生物技术通讯,1994(3). |
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| 作者姓名： | 邓继先 王少飞 杨琴 卢建申 程萱 李琳 周耐明 肖成祖 |
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| 作者单位： | 军事医学科学院生物工程研究所，军事医学科学院生物工程研究所，军事医学科学院生物工程研究所，军事医学科学院生物工程研究所，军事医学科学院生物工程研究所，军事医学科学院生物工程研究所，浙江农业大学蚕学系，军事医学科学院生物工程研究所 北京 100071，北京 100071，北京 100071，北京 100071，北京 100071，北京 100071，杭州 310004，北京 100071 |
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| 摘 要： | 家蚕核多角体病毒(Bombyx mori Nuclear Polyhedrosis Virus.BmNPV)和家蚕细胞已成功地用来大量生产具有生物活性的重组蛋白。但是BmNPV的通用载体的类型较少。因此,本实验构建了BmNPV新型载体pBm92,该载体将多角体蛋白基因的起始密码ATG改变为ATT,然后在多角体蛋白基因的 12位外连接有5个外源基因的克隆位点。将HuIFN-β基因克隆在多角体蛋白基因的 12位后,构建了pBmIFN 12;同时构建HuIFN-β克隆在-3位后的转移栽体pBmIFN-3。将两种转移载体DNA分别与BmNPV基因组DNA共转染Bm-N细胞。利用重组病毒不产生多角体蛋白的特征,筛选重组病毒。用HuIFN-β基因探针与重组病毒DNA进行杂交鉴定。重组病毒BmIFN 12感染Bm-N细胞,其上清IFN活性最高时可达2.0×10~6IU/ml,将BmIFN 12注射5龄家蚕虫体,表达水平为50×10~7IU/ml,是HuIFN-β基因克隆在多角体蛋白基因的-3位后获得的重组病毒的表达量的2～4倍。家蚕体生产的rHulFN-β为糖基化蛋白具有天然HuIFN-β的抗原性。
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| 关 键 词： | BmNPV 转移栽体 β—干扰素 基因表达 |
High Level Expression of the Human Beta-interferon Gene in the Silkworm with Constructing New Type of BmNPV Vector |
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| Deng Jixian Wang Shaofei LuJianshen Yang Qin Cheng Xu Li Ling Zhou Naiming Xiao Chengzu.High Level Expression of the Human Beta-interferon Gene in the Silkworm with Constructing New Type of BmNPV Vector[J].Letters in Biotechnology,1994(3). |
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| Authors: | Deng Jixian Wang Shaofei LuJianshen Yang Qin Cheng Xu Li Ling Zhou Naiming Xiao Chengzu |
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| Keywords: | BmN'PV Transfer vector Human beta-interferon Gene expression |
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