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| HIV-1 p15(Gag)基因的克隆、蛋白表达及抗体制备 | |
| 引用本文： | 柳发勇,刘朝奇,史继静,杨凡,余枫华,杨春秀,韩莉,任东明,韩钰.HIV-1 p15(Gag)基因的克隆、蛋白表达及抗体制备[J].免疫学杂志,2008,24(3):352-355. |
| 作者姓名： | 柳发勇 刘朝奇 史继静 杨凡 余枫华 杨春秀 韩莉 任东明 韩钰 |
| 作者单位： | 1. 三峡大学分子生物学研究所,湖北宜昌,443002 2. 湖北省宜昌市疾病预防控制中心,湖北宜昌,443000 3. 三峡大学医学院,湖北宜昌,443002 |
| 基金项目： | 湖北省卫生厅科研项目 , 三峡大学人才基金 |
| 摘 要： | 目的 为了研究HIV-1 p15(Gag)的生物学活性,制备HIV-1 p15(Gag)蛋白及其特异性抗体.方法 用PCR的方法扩增编码p15(Gag)基因序列,将其克隆到原核表达载体pET28a( )中表达HIV-1 p15蛋白,分别用His抗体和HIV阳性血清做western blot鉴定目的 蛋白.以纯化目的 蛋白为抗原免疫日本大耳白兔,制备多克隆抗体.通过酶联免疫吸附实验(ELISA),免疫细胞化学法检测抗体滴度及其特异性.结果 原核表达载体pET28 a( )-p15(Gag)成功构建,可在大肠杆菌BL21 (DE3)中诱导表达,得到相对分子质量约20000的p15(Gag)蛋白经western blot鉴定正确.纯化蛋白免疫家兔,制备的多克隆抗体具有较强免疫特异性.结论 得到纯化的HIV-1 p15蛋白,制备的多克隆抗体能够检测自然状态下病毒蛋白p15(Gag),为进一步研究HIV-1奠定了实验基础. |
| 关 键 词： | HIV-1p15(Gag)基因 原核表达 免疫原性 多克隆抗体 |
| 文章编号： | 1000-8861(2008)03-0352-04 |
| 修稿时间： | 2007年10月26 |
Cloning, expression, and antibody preparation of HIV-1 p15(Gag) |
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| LIU Fa-yong,LIU Chao-qi,SHI Ji-jing,YANG Fan,YU Feng-hua,YANG Chun-xiu,HAN Li,REN Dong-ming,RAN Yu.Cloning, expression, and antibody preparation of HIV-1 p15(Gag)[J].Immunological Journal,2008,24(3):352-355. | |
| Authors: | LIU Fa-yong LIU Chao-qi SHI Ji-jing YANG Fan YU Feng-hua YANG Chun-xiu HAN Li REN Dong-ming RAN Yu |
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