| 乙型肝炎病毒拉米夫定耐药株的重组逆转录病毒载体及其包装细胞系的建立 |
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| 引用本文： | 林占洲,王战会,周彬,杨富强,余治健,侯金林.乙型肝炎病毒拉米夫定耐药株的重组逆转录病毒载体及其包装细胞系的建立[J].肝脏,2007,12(6):469-471. |
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| 作者姓名： | 林占洲 王战会 周彬 杨富强 余治健 侯金林 |
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| 作者单位： | 广州南方医科大学南方医院感染内科,510515 |
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| 基金项目： | 973项目(2005CB523104) |
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| 摘 要： | 目的构建1.3拷贝乙型肝炎病毒(HBV)拉米夫定耐药株的重组逆转录病毒载体及其包装细胞系。方法在野毒株1.3拷贝HBV载体的基础上采用定点突变的方法将rtL180M,rtM204V位点突变,构建拉米夫定耐药病毒株,并通过PCR、限制性内切酶酶切,分别以正向和反向将野毒株和耐药株分别连接于逆转录病毒载体pLNCX2的相应酶切位点,构建成重组逆转录病毒载体,经双酶切及PCR扩增鉴定。重组载体转染包装细胞,筛选培养细胞克隆并进行病毒滴定。结果通过双酶切、PCR扩增、测序鉴定证实成功构建了1.3拷贝HBV拉米夫定耐药株的逆转录病毒载体。成功建立包装细胞系并测得病毒滴度均为1×105cuf/ml。结论含正向及反向1.3拷贝HBV拉米夫定耐药的重组逆转录病毒载体及其包装细胞系构建成功,可以用于拉米夫定耐药细胞模型研究。
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| 关 键 词： | 乙型肝炎病毒 拉米夫定耐药 逆转录病毒载体 包装细胞系 |
| 修稿时间： | 2007年8月14日 |
Construction of recombinant retrovirus vector containing 1.3-fold-overlength genome of lamivudine-resistant HBV and establishment of its packaging cell line |
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| LIN Zhan-zhou,WANG Zhan-hui,ZHOU Bin,YANG Fu-qiang,YU Zhi-jian,HOU Jing-lin.Construction of recombinant retrovirus vector containing 1.3-fold-overlength genome of lamivudine-resistant HBV and establishment of its packaging cell line[J].Chinese Hepatology,2007,12(6):469-471. |
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| Authors: | LIN Zhan-zhou WANG Zhan-hui ZHOU Bin YANG Fu-qiang YU Zhi-jian HOU Jing-lin |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Hepatitis B virus Lamivudine-resistant Retrovirus vector Packaging cell line |
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