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蟾蜍TNFRSF11b、TNFRSF9基因克隆及生物信息学分析
引用本文:苏岩,褚涵,余坤,潘瑞,叶陈娟,李军德,黄晓,张恬.蟾蜍TNFRSF11b、TNFRSF9基因克隆及生物信息学分析[J].中国现代中药,2023,25(8):1655-1667.
作者姓名:苏岩  褚涵  余坤  潘瑞  叶陈娟  李军德  黄晓  张恬
作者单位:1.重庆市中药研究院 重庆市中药资源学重点实验室,重庆 400065;2.湖北中医药大学 药学院,湖北 武汉 430065;3.中国中医科学院 中药资源中心 重庆分中心,重庆 400065;4.中国中医科学院 中药资源中心,北京 100700;5.中药资源与中药化学湖北省重点实验室,湖北 武汉 430060
基金项目:重庆市科技局绩效激励引导专项(cqac20190001);湖北中医药大学2020年青苗计划资助项目(2020ZZX002)
摘    要:目的 克隆中华蟾蜍肿瘤坏死因子受体超家族(TNFRSF)BbgTNFRSF11bBbgTNFRSF9基因的全长序列,并分析其序列特征。方法 根据转录组测序所得的TNFRSF11bTNFRSF9基因片段设计特异性引物,以中华蟾蜍蟾皮为材料,利用逆转录聚合酶链式反应(PCR)技术获得BbgTNFRSF11bBbgTNFRSF9基因全长互补脱氧核糖核酸(cDNA)序列,并采用生物信息学手段分析其序列特征,通过实时荧光定量PCR方法检测BbgTNFRSF11bBbgTNFRSF9基因在中华蟾蜍7种组织/器官中的表达情况。结果 克隆获得蟾蜍BbgTNFRSF11b基因的全长cDNA序列为1233 bp,编码410个氨基酸,理论相对分子质量为46.97 kDa,等电点为8.64,不存在跨膜区及信号肽,为亲水性蛋白,具有多个磷酸化位点。BbgTNFRSF9基因的全长cDNA序列为829 bp,编码247个氨基酸,理论相对分子质量为67.874 kDa,理论等电点为5.12,存在信号肽,为疏水性蛋白,具有多个磷酸化位点,进化树分析发现BbgTNFRSF11bBbgTNFRSF9基因与其他动物TNFRSF11bTNFRSF9基因相似度不高,表明该基因虽有特殊结构域但不同物种间差异较大。组织表达分析显示,BbgTNFRSF11bBbgTNFRSF9基因在耳后腺中表达显著高于其他部位。结论 成功获得蟾蜍BbgTNFRSF11bBbgTNFRSF9基因序列,掌握其序列特征,为后续深入研究该蛋白的功能提供参考。

关 键 词:蟾蜍  基因克隆  序列分析  肿瘤坏死因子受体超家族
收稿时间:2022/11/17 0:00:00

Cloning and Bioinformatics Analysis of TNFRSF11b and TNFRSF9 in Bufo gargarizans Cantor
SUN Yan,CHU Han,YU Kun,PAN Rui,YE Chen-juan,LI Jun-de,HUANG Xiao,ZHANG Tian.Cloning and Bioinformatics Analysis of TNFRSF11b and TNFRSF9 in Bufo gargarizans Cantor[J].Modern Chinese Medicine,2023,25(8):1655-1667.
Authors:SUN Yan  CHU Han  YU Kun  PAN Rui  YE Chen-juan  LI Jun-de  HUANG Xiao  ZHANG Tian
Affiliation:1.Chongqing Key Laboratory of Traditional Chinese Medicine Resource, Chongqing Academy of Chinese Materia Medica, Chongqing 400065, China;2.College of Pharmacy, Hubei University of Chinese Medicine, Wuhan 430065, China;3.Chongqing Branch of National Resource Center for Chinese Materia Medica, China Academy of;Chinese Medical Sciences, Chongqing 400065, China;4.State Key Laboratory of Dao-di Herbs, National Resource Center for Chinese Materia Medica, China Academy of Chinese Medical Sciences, Beijing 100700, China;5.Hubei Key Laboratory of Traditional Chinese Medicine Resource and Chemistry, Hubei University of Chinese Medicine, Wuhan 430060, China
Abstract:
Keywords:Bufo gargarizans Cantor  gene cloning  sequence analysis  tumor necrosis factor receptor superfamily (TNFRSF)
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