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人β防御素2(HBD2)与人乳头瘤病毒 HPV16E6羧基端编码基因的克隆及其在真核细胞中的表达
引用本文:孙艳,李明,黄宁,吴琦,王伯瑶.人β防御素2(HBD2)与人乳头瘤病毒 HPV16E6羧基端编码基因的克隆及其在真核细胞中的表达[J].西部医学,2003,1(4).
作者姓名:孙艳  李明  黄宁  吴琦  王伯瑶
作者单位:四川大学华西医学中心感染免疫研究室,成都,610041
基金项目:中华纽约医学会基金,国家自然科学基金 
摘    要:目的构建人β防御素与人乳头瘤病毒HPV16E6羧基端基因的真核表达质粒,并检测其在真核细胞中的表达情况,探讨其作为DNA疫苗治疗宫颈癌的可行性.方法利用分子克隆技术,将HBD2基因片段与HPV16E6羧基端基因片段连接,插入真核表达质粒pcDNA3.1,经测序鉴定后,用阳离子脂质体法转染真核细胞COS7,RT-PCR及免疫组化法检测其表达.结果重组质粒pcDNA 3.1/HBD2-HPV16E6C转染COS7细胞48小时后,RT-PCR扩增出插入的HBD2-HPV16E6C片段,免疫组化染色呈棕黄色阳性反应.结论人β防御素与人乳头瘤病毒HPV16E6羧基端融合基因能在真核细胞中有效表达,为今后进行整体动物DNA免疫试验奠定了基础.

关 键 词:人β防御素2  人乳头瘤病毒  分子克隆  真核细胞

Gene cloning and eukaryotic expression of human β defensin 2 and HPV16E6 C-terminal region
Abstract:
Keywords:
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