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| 小鼠胚胎干细胞移植后两种示踪方法的比较 | |
| 引用本文： | 关云谦,谢淑,孙静敏,邹春林,陈凌,张愚.小鼠胚胎干细胞移植后两种示踪方法的比较[J].中国医学科学院学报,2010,32(4). |
| 作者姓名： | 关云谦 谢淑 孙静敏 邹春林 陈凌 张愚 |
| 作者单位： | 1. 首都医科大学,宣武医院,老年病研究所细胞治疗室,北京,100053;教育部神经变性病重点实验室,北京,100053 2. 国家人类基因组北方研究中心,北京,100176 3. 空军第三通信修理所卫生所,北京,100075 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金，国家重点基础研究发展计划(973计划)，北京市科委科技计划 |
| 摘 要： | 目的 观察小鼠胚胎干细胞(ES)移植入大鼠脑内后绿色荧光蛋白(GFP)质粒和Thy-1抗体在指示细胞及细胞分化方面的特点.方法 标记方法一:将p-EGFP-N1质粒转入ES细胞,连续10代抗生素筛选表达GFP的GFP-ES,并将GFP-ES移植入活体大鼠脑内.取材后冰冻切片,在荧光显微镜下观察切片上的绿色荧光.标记方法二:直接移植胚胎干细胞后取材,用特异性抗小鼠Thy-1抗体作移植细胞的免疫组织化学染色,荧光显微镜下观察.另外,两种标记方法均做神经元和胶质细胞的特异抗体神经细胞核抗体(NeuN)和胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)的免疫组织化学染色,观察是否与GFP或Thy-1抗体双标记,以此判定细胞分化情况.结果 GFP质粒转化后的ES细胞团和单细胞均表达亮绿色的GFP,转化效率为30%;移植21d后,大鼠脑内存活的移植细胞仍表达GFP,但不能和NeuN、GFAP的染色双标记.大量Thy-1阳性的植入细胞和NeuN、GFAP双标记.结论 GFP质粒标记胚胎干细胞后移植可以较好地显示移植细胞,但不能观察细胞分化;而Thy-1抗体不仅在显示移植细胞上有较好的效果,还可以准确地标记分化细胞. |
| 关 键 词： | 绿色荧光蛋白 胚胎干细胞 分化 |
Comparison of Two Tracing Method of Transplanted Mouse Embryonic Stem Cell |
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| GUAN Yun-qian,XIE Shu,SUN Jing-min,ZOU Chun-lin,CHEN Ling,ZHANG Yu.Comparison of Two Tracing Method of Transplanted Mouse Embryonic Stem Cell[J].Acta Academiae Medicinae Sinicae,2010,32(4). | |
| Authors: | GUAN Yun-qian XIE Shu SUN Jing-min ZOU Chun-lin CHEN Ling ZHANG Yu |
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