| 重组阴道毛滴虫黏附蛋白33单克隆抗体的制备及鉴定 |
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| 引用本文： | 俞石芳,黄慧聪,谭峰,梁韶辉,郑晓云,李强,潘长旺.重组阴道毛滴虫黏附蛋白33单克隆抗体的制备及鉴定[J].中国人兽共患病杂志,2007,23(3):282-285. |
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| 作者姓名： | 俞石芳 黄慧聪 谭峰 梁韶辉 郑晓云 李强 潘长旺 |
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| 作者单位： | 温州医学院 温州325035 |
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| 摘 要： | 目的制备重组阴道毛滴虫(T.υ)黏附蛋白33(AP33)单克隆抗体(McAb)并进行初步鉴定。方法将pET32(a)-AP33重组质粒转化大肠埃希菌(E.coli)BL21(DE3),用0.5 mmol/L IPTG诱导表达,超声破菌后获得可溶性表达产物,通过Ni-NTA法纯化,以纯化的融合蛋白33为抗原,免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备McAb,用ELISA和有限稀释法筛选出分泌高滴度McAb杂交瘤细胞株,测定其免疫球蛋白亚类及其效价,免疫印迹分析其特异性。结果共筛选出能稳定分泌抗AP33单克隆抗体的5株(4A2,4F11,4F8,4E7,4H11)杂交瘤细胞株,抗体重链均为IgG1;腹水的上清效价为1∶40 000-1∶80 000。免疫印迹分析显示,5株单抗均能与重组阴道毛滴虫AP33发生特异性结合;与阴道毛滴虫抗原分子量为33kDa抗原分子结合。结论制备的抗重组AP33杂交瘤细胞株能分泌识别重组AP33的高特异性单抗,为进一步研究其在阴道毛滴虫病免疫诊断中的应用奠定了基础。
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| 关 键 词： | 阴道毛滴虫 单克隆抗体 免疫印迹 |
| 文章编号： | 1002-2694(2007)03-0282-04 |
| 修稿时间： | 2006-06-10 |
Preparation and identification of monoclonal antibodies against recombinant Trichonmonas vaginalis adhesion protein 33 |
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| YU Shi-fang,HUANG Hui-cong,TAN Feng,LIANG Shao-hui,ZHENG Xiao-yun,LI Qiang,PAN Chang-wang.Preparation and identification of monoclonal antibodies against recombinant Trichonmonas vaginalis adhesion protein 33[J].Chinese Journal of Zoonoses,2007,23(3):282-285. |
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| Authors: | YU Shi-fang HUANG Hui-cong TAN Feng LIANG Shao-hui ZHENG Xiao-yun LI Qiang PAN Chang-wang |
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| Affiliation: | Wenzhou Medical College ,Wenzhou 325035 ,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | AP33 |
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