| 抗牛精子sp18蛋白单链抗体基因的克隆及表达 |
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| 引用本文： | 杨树洪,杨兴元,侯健,安晓荣,陈永福.抗牛精子sp18蛋白单链抗体基因的克隆及表达[J].高技术通讯,2004,14(8):37-40. |
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| 作者姓名： | 杨树洪 杨兴元 侯健 安晓荣 陈永福 |
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| 作者单位： | 中国农业大学农业生物技术国家重点实验室,北京,100094;中国农业大学农业生物技术国家重点实验室,北京,100094;中国农业大学农业生物技术国家重点实验室,北京,100094;中国农业大学农业生物技术国家重点实验室,北京,100094;中国农业大学农业生物技术国家重点实验室,北京,100094 |
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| 基金项目： | 863计划 ( 2 0 0 2AA2 0 63 11，Z2 1 0 1 0 1)资助项目 |
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| 摘 要： | 应用重组噬菌体抗体技术，从小鼠抗牛精子sp18蛋白的A5杂交瘤细胞系中分离总RNA，构建重组噬菌体抗体库。以牛精子作为包被抗原，经过三轮“亲和吸附-洗脱-扩增”淘选后，用phage-ELISA筛选出特异性阳性克隆。取其中特异结合牛精子细胞的重组噬菌体抗体pCSA1克隆进行序列测定。将其ScFv(single chain fragment variable)因克隆到pET-30a( )上，用IPTG进行诱导表达，成功得到了抗sp18单链抗体基因蛋白。
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| 关 键 词： | 单链抗体 sp18 噬菌体展示 筛选 表达 |
Cloning and Expression of the ScFv Gene Against Bull Sperm sp18 Protein |
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| Yang Shuhong,Yang Xingyuan,Hou Jian,An Xiaorong,Chen Yongfu.Cloning and Expression of the ScFv Gene Against Bull Sperm sp18 Protein[J].High Technology Letters,2004,14(8):37-40. |
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| Authors: | Yang Shuhong Yang Xingyuan Hou Jian An Xiaorong Chen Yongfu |
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| Abstract: | sFrom A5 hybridoma cell line which secret anti bull sperm sp18 antibody, total RNA was isolated to construct a recombinant phage antibody library with RPAS system. Three rounds of panning and selecting, the ScFv clone binding bull sperm specifically was selected. After sequence analysis, ScFv gene was ligated to pET 30a(+) vector and transformed into E.coli BL21, in which to express ScFv under the induction of IPTG. |
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| Keywords: | ScFv sp18 Phage display Select Expression |
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