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重组乙型肝炎病毒变异s基因的表达及其抗原性的分析
引用本文:葛军辉,张乐之,姚玉成,刘会敏,王新民,余宏宇,何金,胡以平.重组乙型肝炎病毒变异s基因的表达及其抗原性的分析[J].细胞与分子免疫学杂志,2002,18(6):565-567,574.
作者姓名:葛军辉  张乐之  姚玉成  刘会敏  王新民  余宏宇  何金  胡以平
作者单位:1. 第二军医大学长征医院病理科,上海,200003
2. 第二军医大学长海医院实验诊断科,上海,200433
3. 第二军医大学基础部细胞生物学教研室,上海,200433
基金项目:国家自然科学基金资助No .3 9970 676,3 96670 669
摘    要:目的 构建乙型肝炎病毒(HBV)变异s基因真核表达载体。研究变异所致乙肝表面抗原(HBsAg)免疫学性状的改变。方法 利用Dra Ⅲ和XhoI双酶切含有突变位点的HBV DNA 1.2拷贝的质粒P.38Ⅱ,获得904bp带有突变点的HBV-S基因片段。将其置换含有HBV DNA(adr亚型)S和S2片段的真核表达载体pCMV-S2.S的相应片估,从而构建s基因nt587G→A突变的真核表达载体CMV-S2.S 145R;并转染人肝癌细胞系Hep G2,以获得分泌变异型HBsAg的细胞系。利用EIA及细胞免疫染色法,探讨变异抗原与抗-HBs结合力的变化。结果 构建了HBsAg的第145位甘氨酸-精氨酸突变体的真核表达载体。将其转染哺乳动物细胞后第3天,培养上清中用EIA检测用HBsAg呈阳性,A值随时间延长而上升,但变异型的A值明显低于野生型。变异型和野生型HBsAg细胞免疫化学检测均有部分细胞呈阳性,但差异不显著。结论 HBsAg第145位甘氨酸-精氨酸的突变体的真核表达载体产物具有良好的抗原性,能够与抗-HBs结合,但与野生型相比结合力明显降低。

关 键 词:重组  s基因  乙型肝炎表面抗原  变异  真核表达  免疫细胞化学
文章编号:1007-8738(2002)06-565-03

Expression of recombinant mutant HBsAg gene and its antigenic analysis
GE Jun hui ,ZHANG Le zhi ,YAO Yu cheng ,LIU Hui min ,WANG Xin min ,YU Hong yu ,HE Jin ,HU Yi ping.Expression of recombinant mutant HBsAg gene and its antigenic analysis[J].Journal of Cellular and Molecular Immunology,2002,18(6):565-567,574.
Authors:GE Jun hui  ZHANG Le zhi  YAO Yu cheng  LIU Hui min  WANG Xin min  YU Hong yu  HE Jin  HU Yi ping
Affiliation:GE Jun hui 1,ZHANG Le zhi 2,YAO Yu cheng 3,LIU Hui min 1,WANG Xin min 3,YU Hong yu 1,HE Jin 1,HU Yi ping 3 1 Department of Pathology,Changzheng Hospital,2 Department of Diagnosis,Changhai Hospital,3 Department of Cell Biology,Second Military Medical University,Shanghai 200003,China
Abstract:
Keywords:HBsAg  mutation  eukaryotic expression
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