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MEF2A第11号外显子CAG三联核苷酸重复序列的改变与其转录激活活性的相关性
引用本文:戴大鹏,郑君德,周晓阳,张铁梅,蔡剑平.MEF2A第11号外显子CAG三联核苷酸重复序列的改变与其转录激活活性的相关性[J].医学研究杂志,2009,38(4).
作者姓名:戴大鹏  郑君德  周晓阳  张铁梅  蔡剑平
作者单位:卫生部北京医院/卫生部北京老年医学研究所/卫生部老年医学重点实验室,100730
基金项目:国家自然科学基金,国家高技术研究发展计划(863计划) 
摘    要:目的 探讨MEF2A第11号外显子CAG三联核苷酸重复序列的改变与其转录激活活性的相关性.方法 PCR法扩增富含组氨酸钙结合蛋白(histidine-rich calcium-binding protein,HRC)基因启动子/增强子序列,插入报告载体pGL3-Basic中,生成pGL3-HRC enhancer质粒,该质粒与全长野生型MEF2A cDNA表达质粒pCDNA-MEFcDNA,或含4~15个CAG的变异型MEF2A cDNA表达质粒pCDNA-MEFcDNA-CAGr,以及内参质粒pRL-TK,用脂质体转染法共转染于293T细胞,Westernblot检测MEF2A蛋白的表达,双荧光素酶检测系统测定报告分子的表达.结果 成功构建了MEF2A蛋白体外转录激活活性检测系统;所构建的含4~15个CAG序列的MEF2A变异蛋白,与含11个CAG序列的野生型MEF2A蛋白之间其转录激活活性没有显著性差异.结论 目前已发现的MEF2A第11号外显子CAG重复数目的 改变不会影响MEF2A蛋白的转录激活活性.

关 键 词:三联核苷酸重复序列  增强子  转录激活作用
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