三黄糖肾康对糖尿病大鼠骨组织Wnt/β-catenin信号通路的影响

目的 观察三黄糖肾康对糖尿病大鼠骨组织Wnt/β-连环蛋白（β-catenin）信号通路的影响。方法 采用高糖高脂饮食4周联合左下腹腔内注射新鲜配制的2%链脲佐菌素（pH 4.5）30 mg·kg^-1体质量制备糖尿病模型，成模大鼠按血糖水平随机分为模型组、三黄糖肾康低、高剂量组（12.8、38.4 g·kg^-1）、骨疏康组（1.8 g·kg^-1），另设同周龄喂食普通饲料大鼠为空白组。各组予相应药物或生理盐水灌胃12周后，全自动生化仪检测各组大鼠空腹血糖（FBG）；酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清空腹胰岛素（FINS）、骨特异性碱性磷酸酶（BALP）、抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）；计算机微断层扫描（Micro-CT）扫描大鼠股骨，观察骨组织微结构，检测骨密度（BMD）；苏木素-伊红（HE）染色、番红O-固绿染色观察大鼠股骨组织病理变化；免疫组化（IHC）和蛋白免疫印迹法（Western blot）检测Wnt3a、低密度脂蛋白受体相关蛋白5（LRP-5）及β-catenin蛋白的表达。结果 与空白组比较，模型组大鼠FBG、FINS、TRAP显著升高（P<0.01），BALP显著降低（P<0.01），BMD显著降低（P<0.01），骨小梁结构松散不规则，细长疏稀，出现断裂，脂滴增多，Wnt3a、LRP-5和β-catenin蛋白表达下降（P<0.05，P<0.01）；与模型组比较，三黄糖肾康低、高剂量组FBG降低、BALP升高（P<0.05），三黄糖肾康低剂量组FINS降低（P<0.05），各给药组TRAP均显著降低（P<0.01）；各给药组BMD均有不同程度提高（P<0.05，P<0.01）；各给药组大鼠股骨骨小梁增多、增粗，排列较紧密、整齐，脂滴数量减少，骨微结构形态得到一定的改善；各给药组Wnt3a、LRP-5和β-catenin蛋白平均光密度值均有不同程度提高（P<0.05，P<0.01）；Wnt3a、LRP-5和β-catenin蛋白表达升高（P<0.05，P<0.01）。结论 三黄糖肾康可能通过提高骨组织Wnt3a、LRP-5及β-catenin蛋白的表达，调节Wnt/β-catenin信号传导通路的失调状态，促进骨形成，减少骨吸收，降低血糖，从而达到防治糖尿病骨质疏松症的效果。