| 大鼠Smad7真核表达质粒的构建及在肝星状细胞中的表达 |
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| 引用本文： | 杨小艳,杨勇,郑勇,李睿,周婷,孙侃,常向云,陈卫刚.大鼠Smad7真核表达质粒的构建及在肝星状细胞中的表达[J].世界华人消化杂志,2008,16(28):3146-3151. |
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| 作者姓名： | 杨小艳 杨勇 郑勇 李睿 周婷 孙侃 常向云 陈卫刚 |
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| 作者单位： | 杨小艳 (新疆石河子大学医学院第一附属医院老干一科,新疆维吾尔自治区石河子市,832008)； 杨勇 (新疆石河子大学医学院第一附属医院心内二科,新疆维吾尔自治区石河子市,832008)； 郑勇 (新疆石河子大学医学院第一附属医院消化内科,新疆维吾尔自治区石河子市,832008)； 李睿 (新疆石河子大学医学院第一附属医院消化内科,新疆维吾尔自治区石河子市,832008)； 周婷 (新疆石河子大学医学院第一附属医院中心实验室,新疆维吾尔自治区石河子市,832008)； 孙侃 (新疆石河子大学医学院第一附属医院消化内科,新疆维吾尔自治区石河子市,832008)； 常向云 (新疆石河子大学医学院第一附属医院消化内科,新疆维吾尔自治区石河子市,832008)； 陈卫刚 (新疆石河子大学医学院第一附属医院消化内科,新疆维吾尔自治区石河子市,832008)； |
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| 基金项目： | 教育部科学技术研究重点项目，兵团博士基金 |
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| 摘 要： | 目的:构建并鉴定大鼠Smad7真核表达质粒,观察外源Smad7对肝星状细胞HSC-T6的转染.并进一步研究其对TGF-β1及Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA达水平的影响.方法:采用基因重组技术将Smad7 cDNA插入真核表达载体pcDNA3.1( ),构建大鼠Smad7真核表达质粒.脂质体介导转染HSC-T6细胞,分为正常对照组、空质粒组及转染组,G418筛选,挑取阳性细胞,运用Western blot检测Smad7蛋白表达情况,RT-PCR检测Smad7、TGF-β1及Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA的表达水平.结果:酶切和测序结果证实Smad7真核表达质粒构建成功.Smad7转染组与正常对照、空质粒组比较,Smad7 mRNA表达显著增加(1.053±0.009 VS 0.984±0.054,0.986±0.044,P<0.01或0.05),蛋白水平显著上调(0.083±0.02 VS0.058±0.050,0.056±0.064,均p<0.05:Smad7转染组TGF-β1、Ⅰ型胶原mRNA表达降低(0.961±0.013 VS 1.039±0.013,1.032±0.037;0.592±0.096 VS 0.767±0.085.0.770±0.090,均P<0.01);Ⅲ型胶原mRNA表达差异无统计学意义.正常对照、空质粒组Smad7 mRNA和蛋白水平、TGF-β1、Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNAA达差异无统计学意义.结论:smad7可能参与TGF-β/smad信号转导,在一定程度上具有抗纤维化的生物学活性.
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| 关 键 词： | 构建 真核表达质粒 肝星状细胞 |
Construction of eukaryotic expression vector for rat Smad7 and its expression in hepatic stellate cell line HSC-T6 |
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| Xiao-Yan Yang,Yong Yang,Yong Zheng,Rui Ll,Ting Zhou,Kan Sun,Xiang-Yun Chang,Wei-Gang Chen.Construction of eukaryotic expression vector for rat Smad7 and its expression in hepatic stellate cell line HSC-T6[J].World Chinese Journal of Digestology,2008,16(28):3146-3151. |
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| Authors: | Xiao-Yan Yang Yong Yang Yong Zheng Rui Ll Ting Zhou Kan Sun Xiang-Yun Chang Wei-Gang Chen |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Smad7 |
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