| 基于悬浮点阵技术的新型EGFR基因突变检测方法的建立和应用 |
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| 引用本文： | 娄加陶,吴传勇,薛剑,林强,周海燕,朱晓.基于悬浮点阵技术的新型EGFR基因突变检测方法的建立和应用[J].上海交通大学学报(医学版),2011,31(3):284-289. |
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| 作者姓名： | 娄加陶 吴传勇 薛剑 林强 周海燕 朱晓 |
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| 作者单位： | 1. 上海交通大学附属胸科医院检验科,上海,200030
2. 上海交通大学附属胸科医院胸外科,上海,200030 |
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| 基金项目： | 上海市重大科技攻关子课题 |
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| 摘 要： | 目的构建基于悬浮点阵技术的新型表皮生长因子受体(EGFR)基因突变的检测方法,检测并分析非小细胞肺癌(NSCLC)组织中EGFR酪氨酸激酶抑制剂(TKI)相关的EGFR基因突变状况。方法选取61例经影像学和病理学检查确诊的NSCLC患者作为研究对象,手术后留取新鲜肺癌组织,提取基因组DNA,采用多重聚合酶链式反应(PCR)对组织样本的EGFR基因18、19、20和21号外显子中包含8种高频突变位点的特异片段进行扩增,并经多重连接酶检测反应(LDR)以特异性探针对扩增片段中的突变进行连接,再基于悬浮点阵技术平台对连接产物进行检测,最后通过DNA测序对检测结果进行验证。结果在61例NSCLC组织样本中,运用PCR-LDR联合悬浮点阵技术共检出EGFR基因突变19例,突变率为31.1%,其中外显子19缺失突变E746-A750 del(1)、E746-A750 del(2)各1例,外显子20点突变T790M 1例,外显子21点突变L858R 14例、L861Q2例,经DNA测序验证完全正确。结论运用PCR-LDR联合悬浮点阵技术初步建立了一种新型的EGFR基因突变检测方法,能同时准确检测EGFR基因中的8种高频突变...
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| 关 键 词： | 表皮生长因子受体 悬浮点阵技术 聚合酶链式反应 连接酶检测反应 非小细胞肺癌 |
Preliminary establishment and application of a new method for detection of EGFR mutations based on suspension array technology |
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| LOU Jia-tao,WU Chuan-yong,XUE Jian,LIN Qiang,ZHOU Hai-yan,ZHU Xiao.Preliminary establishment and application of a new method for detection of EGFR mutations based on suspension array technology[J].Journal of Shanghai Jiaotong University:Medical Science,2011,31(3):284-289. |
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| Authors: | LOU Jia-tao WU Chuan-yong XUE Jian LIN Qiang ZHOU Hai-yan ZHU Xiao |
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| Affiliation: | 1(1.Department of Clinical Laboratory,2.Department of Thoracic Surgery,Shanghai Chest Hospital,Shanghai Jiaotong University,Shanghai 200030,China) |
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