雪胆乙素通过抑制小鼠巨噬细胞中AMPK活性抑制NLRP3炎症小体活化和细胞焦亡

目的 本研究旨在探索雪胆乙素对ATP诱导的炎症小体活化和细胞焦亡的影响，并探讨其潜在的作用机制。方法利用第一信号（LPS）刺激巨噬细胞，再以第二信号（ATP）激活NLRP3炎症小体；采用Western blot检测caspase-1、GSDMD等蛋白的表达水平；ELISA检测细胞培养上清液中IL-1β的水平；免疫荧光染色检测雪胆乙素对LPS+ATP诱导的ASC斑点形成的影响；碘化丙锭（PI）染色法检测细胞死亡。结果 我们发现雪胆乙素处理能够抑制ATP诱导的巨噬细胞中ASC斑点的形成，并抑制LPS+ATP刺激下巨噬细胞中caspase-1的切割及活化；进一步抑制成熟IL-1β释放至培养液上清中；同时，雪胆乙素也能够明显抑制巨噬细胞中GSDMD-NT的形成以及细胞焦亡。另外，雪胆乙素能够抑制AMPK的磷酸化，而AMPK的激动剂AICAR促进成熟IL-1β的释放，以及可以明显逆转雪胆乙素对ATP诱导的细胞焦亡的抑制作用。结论 雪胆乙素可能通过抑制巨噬细胞中AMPK的活性而抑制NLRP3炎症小体活化与细胞焦亡。