| 重组蛇毒纤溶酶Fibrolase的复性 |
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| 引用本文： | 张守涛,史婧,郭蔼光.重组蛇毒纤溶酶Fibrolase的复性[J].过程工程学报,2007,7(4):761-766. |
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| 作者姓名： | 张守涛 史婧 郭蔼光 |
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| 作者单位： | 1. 西北农林科技大学农业分子生物学陕西省重点实验室,陕西,杨凌,712100;郑州大学生物工程系,河南,郑州,450001
2. 西北农林科技大学农业分子生物学陕西省重点实验室,陕西,杨凌,712100 |
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| 基金项目： | 西北农林科技大学农业分子生物学重点实验室基金
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郑州大学人才引进基金 |
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| 摘 要： | 将Fibrolase基因克隆入表达载体pET25b(+)，在大肠杆菌BL21(DE3)中进行了高效表达，目的蛋白以包涵体形式存在，占菌体总蛋白的40%左右. 比较了直接稀释法、流加稀释法和透析法的复性效率，同时研究了温度、pH 值、初始蛋白浓度、复性液中盐酸胍浓度和氧化/还原环境等对复性的影响, 得到了较为适宜的复性条件. 结果表明，采用流加稀释复性，并在4℃, pH 8.5, 1.5 mol/L盐酸胍, 1 mmo1/L GSSG, 2 mmo1/L GSH, 初始蛋白浓度10 mg/mL及稀释体积为50倍时，复性效率最高. 重组Fibrolase蛋白在复性和纯化后的收率可达25%左右.
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| 关 键 词： | fibrolase 大肠杆菌 表达 复性 |
| 文章编号： | 1009-606X（2007）04-0761-06 |
| 修稿时间： | 2006-11-23 |
Refolding of Recombinant Snake Venoms Fibrino(geno)lytic Emzyme Fibrolase |
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| ZHANG Shou-tao,SHI Jing,GUO Ai-guang.Refolding of Recombinant Snake Venoms Fibrino(geno)lytic Emzyme Fibrolase[J].Chinese Journal of Process Engineering,2007,7(4):761-766. |
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| Authors: | ZHANG Shou-tao SHI Jing GUO Ai-guang |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | fihrolase E coli expression refolding |
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