| 基因-病毒治疗系统CNHK500-p53的构建和体外初步研究 |
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| 引用本文： | 赵红川,张琪,陈颖华,陆敏强,杨扬,蔡常洁,陈规划.基因-病毒治疗系统CNHK500-p53的构建和体外初步研究[J].肝胆外科杂志,2006,14(6):454-457. |
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| 作者姓名： | 赵红川 张琪 陈颖华 陆敏强 杨扬 蔡常洁 陈规划 |
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| 作者单位： | 中山大学附属第三医院,广州,510630;中山大学附属第三医院,广州,510630;中山大学附属第三医院,广州,510630;中山大学附属第三医院,广州,510630;中山大学附属第三医院,广州,510630;中山大学附属第三医院,广州,510630;中山大学附属第三医院,广州,510630 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展计划(973计划) |
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| 摘 要： | 目的构建一种新的基因-病毒治疗系统。方法通过基因操作技术将目的基因表达盒mCMV启动子 p53基因 SV40polyA插入腺病毒E1A基因受端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子调控、E1B基因受缺氧反应元件(HRE)启动子调控的增殖病毒载体质粒pSG500的E1A下游,得到腺病毒质粒pSG500-p53;通过pSG500-p53与5型腺病毒右臂的质粒pBHGE3在293细胞中同源重组得到重组病毒CNHK500-p53;利用Westernblot和ELISA法检测病毒E1A、E1B基因和p53抑癌基因的表达;TCID50方法测定病毒滴度;通过增殖实验观察重组病毒的选择性增殖能力;应用细胞病理效应(CPE)实验检测病毒抗肿瘤作用。结果CNHK500-p53的病毒滴度为2×1010pfu/ml,增殖实验证实CNHK500-p53可以选择性地在端粒酶阳性和缺氧微环境的肝癌细胞中增殖,CNHK500-p53所携带的p53基因在肝癌细胞株中的表达量388±34.6μg/L明显高于非增殖型腺病毒载体Ad-p53的76.3±13.17μg/L(P<0.005),并显示了较强的抗肿瘤效应。结论CNHK500-p53是一种具备治疗肝癌潜力的新型基因-病毒治疗系统。
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| 关 键 词： | 腺病毒 端粒酶逆转录酶 缺氧反应元件 p53基因 肝癌 |
| 文章编号： | 1006-4761（2006）06-0454-04 |
| 收稿时间： | 2006-11-10 |
| 修稿时间： | 2006-11-20 |
CONSTRUCTION OF A NOVEL GENE-VIRAL THERAPEUTIC SYSTEM CNHK500-p53 AGAINST LIVER CANCER |
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| Affiliation: | (ZHAO Hong-chuan,ZHANG Qi,CHEN Gui-hua,et al. Transplantation Research Institute of Sun Yat-sen University,Guangzhou 510630,China) |
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