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甲基化特异性PCR检测PRAME基因启动子低甲基化30例及其临床应用
引用本文:朱照辉,林江,钱军,姚冬明,钱震,王雅丽,肖高飞.甲基化特异性PCR检测PRAME基因启动子低甲基化30例及其临床应用[J].重庆医学,2010,39(23).
作者姓名:朱照辉  林江  钱军  姚冬明  钱震  王雅丽  肖高飞
作者单位:1. 江苏大学附属人民医院血液科,江苏,212002
2. 江苏大学附属人民医院中心实验室,江苏,212002
3. 江苏大学附属人民医院检验科,江苏,212002
基金项目:,江苏省医学重点人才资助项目,镇江市社会发展项目,江苏省卫生厅'科教兴卫工程'--苏州大学附属第一医院血液学学科开放课题基金项目,江苏大学临床医学科技发展基金资助项目
摘    要:目的 建立实时定量甲基化特异性PCR(RQ-MSP)法检测急性髓系白血病(AML)患者黑色素瘤优先表达的抗原(PRAME)基因低甲基化水平,初步评价其临床意义.方法 用亚硫酸氢盐修饰后的基因组DNA为模板,建立EvaGreen染料法RQ-MSP检测PRAME基因低甲基化水平方法,检测18例(对照组)和30例(AML组)患者的骨髓单个核细胞中PRAME基因启动子低甲基化水平.结果 RQ-MSP融解曲线呈单一峰,标准品 5×107~5×102 copy/μL重复性良好;AML患者PRAME基因低甲基化水平(0.96~4 508.96,中位772.42)明显高于对照组(0~100.00,中位25.29),差异有统计学意义(P=0.002).结论 建立的PRAME基因低甲基化RQ-MSP法特异性、重复性和灵敏性良好,可用于AML初诊和病情监测.

关 键 词:甲基化特异性PCR  基因  黑色素瘤优先表达抗原  低甲基化

Methylation-specific PCR detection for hypomethylation in PRAME gene promoter of 30 cases and its clinical application
ZHU Zhao-hui,LIN Jiang,QIAN Jun,et al..Methylation-specific PCR detection for hypomethylation in PRAME gene promoter of 30 cases and its clinical application[J].Chongqing Medical Journal,2010,39(23).
Authors:ZHU Zhao-hui  LIN Jiang  QIAN Jun  
Affiliation:ZHU Zhao-hui1,LIN Jiang2,QIAN Jun1,et al.
Abstract:Objective To establish and evaluate the method of real-time quantitative methylation-specific PCR(RQ-MSP)for detecting hypomethylation of PRAME gene promoter in the patients with acute myeloid leukemia(AML).Methods Genomic DNA modified by sodium bisulfite was used as a template.RQ-MSP with EvaGreen dye was established to detect the hypomethylation of PRAME promoter.The samples from 30 AML patients and 18 controls were detected.Results The melting cure showed a single peak.In repeated tests,maximal sensitivi...
Keywords:methylation-specific PCR  gene  preferentially expressed antigen of melanoma  Hypomethylation  
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