| 温郁金中茉莉酸氨基酸合酶关键基因JAR的克隆及生物信息学分析 |
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| 引用本文： | 李帆,薛畅,张金华,任仙樱,喻明军,吴志刚,姜程曦.温郁金中茉莉酸氨基酸合酶关键基因JAR的克隆及生物信息学分析[J].中草药,2022,53(6):1838-1843. |
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| 作者姓名： | 李帆 薛畅 张金华 任仙樱 喻明军 吴志刚 姜程曦 |
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| 作者单位： | 温州大学生命科学研究院, 浙江温州 325035;温州医科大学药学院, 浙江温州 325035;大理药业股份有限公司, 云南 大理 671000;温州莪金医药有限公司, 浙江 乐清 325600;安徽环球基因科技有限公司, 安徽 滁州 239004 |
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| 基金项目： | 大理药业股份有限公司横向课题（KJHX1603）；温莪术规范化生产及基地建设研究（KJHX2008） |
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| 摘 要： | 目的 克隆温郁金茉莉酸氨基酸合酶关键基因JAR(JA-amino acid synthetase)的全长c DNA序列，并进行生物信息学和表达分析。方法 根据温郁金转录组数据设计特异性引物。以温郁金根茎的c DNA为模板，通过RT-PCR扩增获得JAR全长c DNA序列，利用生物信息学软件预测基因编码蛋白的特征；利用ClustalW和MEGA 6.06软件构建温郁金JAR的系统进化树；构建原核表达载体PET-22B(+)-JAR，纯化重组蛋白JAR5，并进行鉴定。结果 扩增后的基因编码582个氨基酸，全长1749 bp，且具有典型的GH3特征结构域，不具跨膜域，不存在信号肽，属于不稳定蛋白；PCR扩增后得到约1 800 bp大小的片段，经凝胶过滤色谱纯化，最终得到基于蛋白印迹实验(Western blotting)验证正确的66 200大小的重组蛋白。结论 首次克隆并分析了温郁金JAR基因，纯化了JAR5蛋白，为进一步研究温郁金JAR基因蛋白功能研究提供依据。
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| 关 键 词： | 温郁金 JAR基因 基因克隆 JAR5 蛋白纯化 |
| 收稿时间： | 2021/10/21 0:00:00 |
Cloning and protein purification of key gene JAR of jasmonate amino acid synthase in Curcuma wenyujin |
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| LI Fan,XUE Chang,ZHANG Jin-hu,REN Xian-ying,YU Ming-jun,WU Zhi-gang,JIANG Cheng-xi.Cloning and protein purification of key gene JAR of jasmonate amino acid synthase in Curcuma wenyujin[J].Chinese Traditional and Herbal Drugs,2022,53(6):1838-1843. |
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| Authors: | LI Fan XUE Chang ZHANG Jin-hu REN Xian-ying YU Ming-jun WU Zhi-gang JIANG Cheng-xi |
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| Affiliation: | Institute of Life Sciences, Wenzhou University, Wenzhou 325035, China;School of Pharmacy, Wenzhou Medical University, Wenzhou 325035, China;Dali Pharmaceutical Co., Ltd., Dali 671000, China;Wenzhou Ejin Pharmaceutical Co., Ltd., Yueqing 325600, China;Anhui Global Gene Technology Co., Ltd., Chuzhou 239004, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Curcuma wenyujin Y H Chen & C Ling JAR gene gene cloning JAR5 protein purification |
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