GABA／孕酮激发豚鼠精子聚磷酸肌醇降解及其在顶体反应中的作用

目的 研究GABA／孕酮（P4）激发精子聚磷酸肌醇（PPI）降解及其在顶体反应（AR）中的作用。方法 将豚鼠精子在MCM培养基获能培养5.5h,^32P-标记精子1h,经Percoll密度梯度离心洗涤，然后以AR刺激剂激发精子AR，并对精子膜脂进行提取、分离和鉴定；同时，以相差显微镜评价精子AR％。结果 1、GABA刺激二磷酸磷脂酰肌醇（PIP2）和一磷酸磷脂酰肌醇（PIP）迅速降解，而磷脂酸（PA）增加；在5min时PIP2和PIP明显下降，10min几近完成。而AR明显滞后，15min才达到峰值：2、A23187、P4和GABA均可激发PPI降解和AR增加，其能力依次为A23187＞P4≥GABA；3、新霉素可明显地抑制Ca^2 /GABA或P4及A23187刺激PIP2和PIP降解，PA产生和AR增加；4、PPI降解需Ca^2 参与。当EGTA或Ca^2 通道阻滞剂（La^3 ）存在时，PIP2和PIP降解，PA产生和AR升高均被明显抑制。结论 天然激动剂GABA或P4刺激豚鼠精子膜PPI降解是引起AR的基础，该作用是通过Ca^2 介导，激活膜磷脂酰肌醇特异磷酸脂酶C（PIC)而完成的。