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鸡源大肠杆菌CRISPR特征及其与耐药性的关系
引用本文:李 琳,赵 霞,王 磊,等.鸡源大肠杆菌CRISPR特征及其与耐药性的关系[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2018,46(5):30-36.
作者姓名:李 琳  赵 霞  王 磊  
作者单位:安徽农业大学动物科技学院
基金项目:国家自然科学基金项目(31772802);安徽高样自然科学重点项目(KJ2017A132);安徽省优秀青年人才支持计划重点项目(gxyqZD2016041)
摘    要:【目的】研究鸡源大肠杆菌成簇间隔短回文重复序列(Clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR)与耐药性的关系,并对CRISPR进行生物信息学分析,为进一步研究CRISPR功能及其对细菌耐药的影响奠定基础。【方法】对从安徽省合肥地区养鸡场分离鉴定的130株鸡源大肠杆菌进行耐药性(16种抗菌药物)和CRISPR检测,分析CRISPR与鸡源大肠杆菌多重耐药的关系。挑选扩增出片段长度不同的12株大肠杆菌,对其CRISPR PCR产物进行测序,通过BLAST进行二级结构预测,用CRISPRTarget等对其重复序列和间隔序列进行生物信息学分析。【结果】130株鸡源大肠杆菌对16种抗菌药物的耐药率为2.3%~97.7%,118株大肠杆菌对3种及3种以上药物耐药;共有39株菌检测到CRISPR,阳性率为30%;CRISPR阳性菌株均为多重耐药菌株,其耐药率(100%)显著高于CRISPR阴性菌株(87%),CRISPR序列差异性与耐药性之间无直接相关性。CRISPR序列同源性较低的12株大肠杆菌均包含2条(11号菌除外)长度为29bp的重复序列,这些序列可分为5类,其RNA二级结构都能形成回文结构,但茎环大小有差异。从这12株大肠杆菌中共发现间隔序列168条,其中77条为新发现序列;同源性比对发现,在112条有比对结果的间隔序列中,72.3%来源于质粒,25.0%来源于噬菌体,2.7%来源于细菌和病毒。【结论】携带CRISPR的鸡源大肠杆菌广泛存在,CRISPR可能与大肠杆菌耐药表型相关,明确了CRISPR的结构特征。

关 键 词:大肠杆菌  CRISPR  耐药性  重复序列  间隔序列
收稿时间:2017/2/23 0:00:00

Relationship of CRISPR in Escherichia coli isolates from chickens with drug resistance and its characteristics
LI Lin,ZHAO Xia and WANG Lei,et al.Relationship of CRISPR in Escherichia coli isolates from chickens with drug resistance and its characteristics[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2018,46(5):30-36.
Authors:LI Lin  ZHAO Xia and WANG Lei  
Abstract:
Keywords:Escherichia coli  CRISPR  drug resistance  direct repeats  spacers
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