携带质粒的PLGA纳米粒-超声微泡复合体的构建及细胞相容性研究 |
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引用本文: | 程龙,刘成珪,张凯伦,胡志伟,李源.携带质粒的PLGA纳米粒-超声微泡复合体的构建及细胞相容性研究[J].华中科技大学学报(医学版),2013(4):377-381. |
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作者姓名: | 程龙 刘成珪 张凯伦 胡志伟 李源 |
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作者单位: | 华中科技大学同济医学院附属协和医院心血管外科 |
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基金项目: | 国家自然科学基金资助项目(No.30872543) |
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摘 要: | 目的构建携带tPA基因质粒的聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)纳米粒-超声微泡复合体,检测其理化性质、体外缓释方式、细胞相容性。方法应用双次乳化法制备携有tPA基因质粒的PLGA纳米粒;应用薄膜水化超声法制备阳离子超声微泡;两者通过静电吸附作用,形成质粒-纳米粒-超声微泡复合体(plasmid encapsulated nanoparticle-mi-crobubble complex,PENMC)。检测PLGA纳米粒的质粒载量,该复合体PENMC的质粒载量;检测PLGA纳米粒及复合体体外缓释质粒的情况;CCK-8法检测纳米粒及复合体PENMC的细胞毒性。结果检测携带质粒的纳米粒粒径为(217.2±2.2)nm,zeta电位为(-15.24±0.83)mV。微泡平均大小为(3.2±1.5)μm,zeta电位为(13.66±2.05)mV。微泡浓度为(4.3±1.1)×108/mL。PENMC平均直径为(4.6±1.7)μm,zeta电位为(2.23±1.45)mV。浓度为(3.0±1.3)×108/mL。1mg PLGA纳米粒载有质粒(42.3±2.1)μg。1mL PENMC中带有质粒(20.5±2.7)μg。PLGA纳米粒及复合体PENMC前7d累计释放量均为(57±3)%。起始段短时间内快速释放,后呈现稳定、缓慢释放。体外细胞毒实验证实PLGA纳米粒及复合体PENMC均未见明显细胞毒性效应。结论所构建的纳米粒-超声微泡复合体显示出较好的缓释效果,较低的细胞毒性,为后续将其应用于基因治疗奠定了实验基础。
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关 键 词: | 纳米粒 超声微泡造影剂 组织型纤溶酶原激活因子 抗凝治疗 非病毒载体 |
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