GINS2基因siRNA真核表达质粒的构建及其对NB4细胞凋亡的影响 |
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引用本文: | 高艳军,刘北忠,钟梁,初晨,吴秀娟,黎亮,张曦,高远梅,胡秀秀.GINS2基因siRNA真核表达质粒的构建及其对NB4细胞凋亡的影响[J].粉末涂料与涂装,2012,25(12):1602-1606. |
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作者姓名: | 高艳军 刘北忠 钟梁 初晨 吴秀娟 黎亮 张曦 高远梅 胡秀秀 |
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作者单位: | 重庆医科大学临床检验诊断学教育部重点实验室 重庆 400016 |
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基金项目: | 国家自然科学基金(项目编号:NSFC,81171658)重庆市自然科学基金(项目编号:CSTC,2011BA503) |
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摘 要: | 目的构建GINS2基因siRNA真核表达质粒,并检测其对NB4细胞凋亡的影响。方法人工合成针对GINS2基因的4组siRNA干扰序列和1组无同源性的序列,测序鉴定后转染低传代人早幼粒细胞系NB4细胞,经G418筛选后,通过QRT-PCR、Western blot检测重组质粒对NB4细胞中GINS2基因mRNA转录水平和蛋白表达水平的影响;流式细胞术检测NB4细胞的凋亡情况。结果 5组重组质粒经测序证明构建正确,4组干扰质粒转染NB4细胞后,细胞中GINS2基因mRNA的转录水平和蛋白的表达水平均有所降低,其中干扰组1基因干扰率达50%,蛋白相对表达量为56%;干扰组1细胞凋亡率为32.54%,较正常对照组和NC组明显上升(P<0.01)。结论成功构建了GINS2基因siRNA真核表达质粒,抑制GINS2基因的表达可促进NB4细胞的凋亡,为进一步研究GINS2基因在白血病中的作用奠定了基础。
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关 键 词: | GINS2基因 RNA干扰 NB4细胞 细胞凋亡 |
Construction of eukaryotic expression vector for siRNA targeting GINS2 gene and its effect on apoptosis of NB4 cells |
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Abstract: | |
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Keywords: | GINS2 gene RNA interference NB4 cells Cell apoptosis |
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