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GINS2基因siRNA真核表达质粒的构建及其对NB4细胞凋亡的影响
引用本文:高艳军,刘北忠,钟梁,初晨,吴秀娟,黎亮,张曦,高远梅,胡秀秀.GINS2基因siRNA真核表达质粒的构建及其对NB4细胞凋亡的影响[J].粉末涂料与涂装,2012,25(12):1602-1606.
作者姓名:高艳军  刘北忠  钟梁  初晨  吴秀娟  黎亮  张曦  高远梅  胡秀秀
作者单位:重庆医科大学临床检验诊断学教育部重点实验室 重庆 400016
基金项目:国家自然科学基金(项目编号:NSFC,81171658)重庆市自然科学基金(项目编号:CSTC,2011BA503)
摘    要:目的构建GINS2基因siRNA真核表达质粒,并检测其对NB4细胞凋亡的影响。方法人工合成针对GINS2基因的4组siRNA干扰序列和1组无同源性的序列,测序鉴定后转染低传代人早幼粒细胞系NB4细胞,经G418筛选后,通过QRT-PCR、Western blot检测重组质粒对NB4细胞中GINS2基因mRNA转录水平和蛋白表达水平的影响;流式细胞术检测NB4细胞的凋亡情况。结果 5组重组质粒经测序证明构建正确,4组干扰质粒转染NB4细胞后,细胞中GINS2基因mRNA的转录水平和蛋白的表达水平均有所降低,其中干扰组1基因干扰率达50%,蛋白相对表达量为56%;干扰组1细胞凋亡率为32.54%,较正常对照组和NC组明显上升(P<0.01)。结论成功构建了GINS2基因siRNA真核表达质粒,抑制GINS2基因的表达可促进NB4细胞的凋亡,为进一步研究GINS2基因在白血病中的作用奠定了基础。

关 键 词:GINS2基因  RNA干扰  NB4细胞  细胞凋亡

Construction of eukaryotic expression vector for siRNA targeting GINS2 gene and its effect on apoptosis of NB4 cells
Abstract:
Keywords:GINS2 gene  RNA interference  NB4 cells  Cell apoptosis
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