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RNA干扰20S蛋白酶体α亚基基因对莱茵衣藻油脂代谢的影响
引用本文:李兴涵,费小雯,李亚军,邓晓东.RNA干扰20S蛋白酶体α亚基基因对莱茵衣藻油脂代谢的影响[J].热带亚热带植物学报,2020,28(4):329-338.
作者姓名:李兴涵  费小雯  李亚军  邓晓东
作者单位:中国热带农业科学院热带生物技术研究所, 海南省海洋生物资源功能性成分研究与利用重点实验室, 海口 571101;海南医学院基础医学与生命科学学院, 海口 571199
基金项目:海南省重点科技计划(ZDYF2018124);农业农村部财政专项资金(NFZX2018);国家自然科学基金项目(31870344);中国热带农业科学院基本科研业务费专项资金(19CXTD-32,1630052018001);中国热带农业科学院热带生物技术研究所基本科研业务费专项资金(1630052016009)资助
摘    要:为了解20S蛋白酶体α亚基(20S proteasome alpha subunit A, POA1)基因对莱茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)油脂代谢的调控,对莱茵衣藻CC425在低氮胁迫下的CrPOA1表达进行了分析,克隆POA1同源基因片段,构建pMaa7IR/XIR干涉载体并转化莱茵衣藻CC425,对CrPOA1进行有效沉默,测定转基因藻株细胞干质量和油脂含量;克隆全长基因,构建CrPOA1-GFP融合表达载体并转化洋葱表皮细胞,进行亚细胞定位。结果表明,莱茵衣藻在低氮培养下,CrPOA1 mRNA水平比对照(正常培养)显著降低(P0.01),RNAi转基因藻株CrPOA1 mRNA水平比对照pMaa7IR/XIR(maa7)降低79.36%~85.35%,沉默效果较好;RNAi转基因藻株细胞干质量与对照maa7无显著差异,油脂含量比对照maa7显著降低6.38%~24.63%,CrPOA1正向调控莱茵衣藻油脂;亚细胞定位于细胞核。这表明CrPOA1参与了莱茵衣藻的油脂代谢过程。

关 键 词:莱茵衣藻  20S蛋白酶体α亚基  RNA干扰  油脂  亚细胞定位
收稿时间:2019/10/16 0:00:00
修稿时间:2020/1/1 0:00:00
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