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犬瘟热病毒中国分离株囊膜糖蛋白基因免疫小鼠诱发的抗体应答
引用本文:徐向明,崔治中,殷俊,杨玲,吴宝金,薛整风,李厚达.犬瘟热病毒中国分离株囊膜糖蛋白基因免疫小鼠诱发的抗体应答[J].中国预防兽医学报,2003,25(6):419-422.
作者姓名:徐向明  崔治中  殷俊  杨玲  吴宝金  薛整风  李厚达
作者单位:1. 扬州大学,畜牧兽医学院,江苏,扬州,225009
2. 山东农业大学,动物科技学院,山东,泰安,271018
摘    要:将CDV中国分离株(YZ0101)的两囊膜糖蛋白基因F和H与pGEM—rreasy载体构建的重组质粒分别采用EcoRI和Kprd、BamHI和Kpnl双酶切后定向克隆进真核表达载体pcDNA3.1(-)中,DNA测序和限制性酶切分析筛选阳性克隆pcDNA-H和pcDNA-F,以重组质粒DNA和脂质体共转染COS-7细胞,用间接免疫荧光试验验证转染的COS-7细胞胞浆中分别表达了CDV的H和F蛋白。以聚乙烯胺(PEI)为佐剂,将犬瘟热病毒F和H基因重组质粒pcDNA-H和pcDNA-F的DNA分别或混合肌注6周龄BABI/c小鼠,同时设pcDNA原载体DNA对照。以2周为间隔共免疫4次。最后一次免疫后3周,采血分离血清,酶联免疫吸附试验(ELISA)和病毒中和试验(SN)分析基因免疫在小鼠体内诱导的免疫应答。结果显示:pcDNA-H和pcDNA-F试验组免疫4次后分别激发了10^2.99 0.134、10^2.93 0.164滴度的ELISA抗体;两种质粒DNA混合免疫后产生了1:32~1:128的抗CDV的中和抗体;而原载体DNA免疫后,用ELISA和SN未检测出特异的CDV抗体。表明犬瘟热病毒囊膜糖蛋白F和H基因免疫小鼠可诱发产生特异性的体液免疫。

关 键 词:CDV  中国分离株  F基因  H基因  DNA免疫  抗体
文章编号:1008-0589(2003)06-0419-05
修稿时间:2003年3月12日

Antibody response in mice induced by CDV envelope glycoprotein gene of Chinese isolate
XU Xiang-ming,CUI Zhi-zhong,YIN Jun,YANG Ling,WU Bao-jin,XUE Zheng-feng,LI Hou-da.Antibody response in mice induced by CDV envelope glycoprotein gene of Chinese isolate[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2003,25(6):419-422.
Authors:XU Xiang-ming  CUI Zhi-zhong  YIN Jun  YANG Ling  WU Bao-jin  XUE Zheng-feng  LI Hou-da
Affiliation:XU Xiang-ming~1,CUI Zhi-zhong~2,YIN Jun~1,YANG Ling~1,WU Bao-jin~1,XUE Zheng-feng~1,LI Hou-da~1
Abstract:
Keywords:canine distemper virus  Chinese isolate  envelope glycoprotein gene F and H  DNA immunization  antibody
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