化疗诱导损伤相关分子模式强化CIK对肺癌A549 细胞的抑制作用

目的：探讨化疗诱导损伤相关分子模式（damaged associated molecular patterns,DAMP)对CIK 细胞抑制RAS 突变A549 肺腺癌细胞的影响及其机制。方法：体外分离人外周血单个核细胞且培养CIK 细胞,以顺铂（cisplatin,DDP）和多柔比星（doxorubicin,ADM）单独或联合作用于A549 细胞,镜下观察A549 细胞的形态,将药物后的A549 细胞上清加入CIK细胞共培养,流式细胞术检测共培养后CIK 细胞免疫表型,MTT 实验检测A549 细胞上清诱导CIK 细胞对A549 肺腺癌细胞增殖的抑制,ELISA实验检测多种浓度化疗药物杀伤A549 细胞上清中CRT、ATP、HMGB1 含量。结果：低质量浓度化疗药杀伤A549 细胞后呈现较多的免疫原性死亡特征。杀伤后A549 细胞上清加入CIK 细胞共培养使CIK 细胞CD8+、CD56+的比例较对照CIK 细胞明显升高（均P<0.05）。A549 细胞损伤后上清诱导CIK细胞对A549 肺腺癌细胞增殖抑制率明显高于同质量浓度化疗药组[DDP组（31.34±1.51）% vs（5.97±1.74）%,ADM组（45.46±1.78）% vs（6.22±1.34）%,DDP+ADM组（45.78±1.14）% vs（11.94±3.11）%,均P<0.05],并且低质量浓度化疗药物杀伤A549 细胞上清诱导的CIK对A549 细胞的抑制率高于较高浓度化疗药物杀伤后细胞上清诱导的CIK（均P<0.05）。低质量浓度化疗药物杀伤A549 细胞上清中免疫原性死亡相关分子CRT、ATP、HMGB1 含量增加得最多（均P<0.05）。低质量浓度组该上清诱导的CI 对A549 肺腺癌细胞的增殖抑制率随着CRT、ATP、HMGB1 水平的增高而增加。结论：较低质量浓度的DDP和ADM单独或联合用药更易引起A549 细胞免疫原性死亡并释放较高水平的DAMP分子,能更强的促进CIK对肺癌A549 细胞的抑制作用。