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玻璃化法超低温保存怀山药种质的技术研究
引用本文:洪森荣,李明军.玻璃化法超低温保存怀山药种质的技术研究[J].医学教育探索,2006(11):1715-1718.
作者姓名:洪森荣  李明军
作者单位:河南师范大学生命科学学院,上饶师范学院生命科学系 江西上饶334001,河南师范大学生命科学学院,华中农业大学园艺植物生物学教育部重点实验室,湖北武汉430070,河南新乡453007,河南新乡453007
基金项目:国家自然科学基金项目(30670208),河南省重点科技攻关项目(0623030700)
摘    要:目的研究怀山药种质资源的玻璃化超低温保存技术。方法以B号怀山药带芽茎段为材料进行玻璃化超低温保存,并采用培养法检测保存后材料的成活率,从而筛选出最佳的玻璃化超低温保存技术体系。结果B号怀山药带芽茎段玻璃化超低温保存较佳的技术体系是继代生长60d的怀山药无菌苗置4℃冰箱低温锻炼7d;在无菌条件下切取1~1.5cm的带芽茎段,转至含5%蔗糖 3%甘露糖的培养基内,置4℃冰箱预培养2d;用60%的PVS1(22%甘油 13%乙二醇 13%聚乙二醇 10%二甲基亚砜)在0℃处理60min,再用100%的PVS1在0℃条件下处理60min,随即迅速投入液氮;保存24h后,在37℃水浴中快速化冻,用含7%蔗糖的MS培养液洗涤4次,每次停留10min;转至再生培养基(MS KT2mg/L NAA0.02mg/L)再培养,成活率可达75%以上,再生苗与常温苗形态指标差异不大。结论本试验成功地建立了怀山药种质资源玻璃化法超低温保存的技术体系,为怀山药种质资源的长期保存提供了一条有效途径。

关 键 词:怀山药  种质资源  玻璃化法  超低温保存
收稿时间:3/8/2006 12:00:00 AM

Cryopreservation technique of Dioscorea opposita germplasm by vitrification
HONG Sen-rong,LI Ming-jun.Cryopreservation technique of Dioscorea opposita germplasm by vitrification[J].Researches in Medical Education,2006(11):1715-1718.
Authors:HONG Sen-rong  LI Ming-jun
Affiliation:1. College of Life Science, Henan Normal University, Xinxiang 453007, China; 2. Department of Life Science, Shangrao Normal College, Shangrao 334001, China; 3. Key Laboratory of Horticultural Plant Biology, Ministry of Education, Huazhong Agricultural University, Wuhan 430070, China
Abstract:
Keywords:Dioscorea opposita Thunb    germplasm resources  vitrification  cryopreservation
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