葛花、枳椇子及其配伍对小鼠急性酒精性胃黏膜损伤的保护作用及机制

目的 探讨葛花、枳椇子及其配伍对急性酒精性胃黏膜损伤的改善作用，为进一步开展葛花、枳椇子及其配伍防治酒精致多脏器损伤奠定基础。方法 采用多次灌胃给予56%红星二锅头白酒（15 mL·kg^-1）建立小鼠急性酒精性胃黏膜损伤模型，将120只ICR雄性小鼠随机分为空白组、模型组、奥美拉唑组（0.026 g·kg^-1）、葛花-枳椇子（配伍）高、中、低剂量组（29.2、14.6、7.3 g·kg^-1）、葛花组（19.5 g·kg^-1）、枳椇子组（19.5 g·kg^-1）共8个组，每组15只，动物适应性喂养1周后，按10 mL·kg^-1预给相应药物3 d，从第4天开始，给药1 h后按15 mL·kg^-1灌胃二锅头白酒，空白组给予相同体积去离子水，记录小鼠醉酒和醒酒时间，连续给药给酒3 d，末次给药1 h后摘眼球处死；气相色谱仪测定各组小鼠血清中乙醇体积分数，紫外-可见分光光度计检测各组小鼠胃黏膜中乙醇脱氢酶（ADH）活性；苏木素-伊红（HE）染色观察胃黏膜病理变化；酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测各组小鼠血清中炎症因子含量；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测核转录因子-κB（NF-κB）p65和NF-κB抑制蛋白α（IκBα）mRNA表达。结果 与正常组比较，模型组血清中白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-1β（IL-1β）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量升高（P<0.05），胃黏膜组织NF-κB p65 mRNA表达升高（P<0.01），IκBα mRNA表达降低（P<0.01）；与模型组比较，奥美拉唑组、配伍高、中剂量组、葛花组醉酒时间延长（P<0.05），配伍高、中剂量组醒酒时间缩短（P<0.05），配伍高剂量组血清中乙醇体积分数降低（P<0.05），奥美拉唑组、配伍高、中剂量组胃黏膜中ADH活性升高（P<0.05），配伍各剂量组、葛花组肉眼损伤评分降低（P<0.05），奥美拉唑组、配伍各剂量组、葛花组病理损伤评分降低（P<0.01），各给药组血清中IL-6表达降低（P<0.05），奥美拉唑组、配伍各剂量组、枳椇子组血清中IL-1β表达降低（P<0.05），配伍高、中剂量组血清中TNF-α表达降低（P<0.05），各给药组胃黏膜组织NF-κB p65 mRNA表达降低（P<0.05），奥美拉唑组、配伍各剂量组胃黏膜组织IκBα mRNA表达增加（P<0.05）；与高剂量组比较，配伍低剂量组与枳椇子组醉酒时间缩短（P<0.01），葛花、枳椇子组醒酒时间延长（P<0.01），配伍中、低剂量组、葛花组、枳椇子组血清中乙醇体积分数升高（P<0.05），配伍中、低剂量组、枳椇子组肉眼损伤积分增加（P<0.05），配伍中、低剂量组、葛花组、枳椇子组病理损伤积分增加（P<0.01），配伍低剂量组、葛花组、枳椇子组血清中IL-1β含量升高（P<0.01），葛花组与枳椇子组胃黏膜组织IκBα mRNA表达量降低（P<0.05）；与配伍中剂量组比较，枳椇子组醉酒时间缩短（P<0.05），葛花组醒酒时间延长（P<0.05），葛花组、枳椇子组病理损伤积分增加（P<0.01），配伍低剂量组、葛花组、枳椇子组血清中IL-1β含量升高（P<0.05）；与配伍低剂量组比较，枳椇子组病理损伤积分增加（P<0.05）。结论 葛花、枳椇子及其配伍能起到对小鼠急性酒精性胃黏膜损伤的防治作用，可能与抑制胃黏膜NF-κB信号通路的表达有关，且配伍高剂量组药效最佳。