| 应用SYBR荧光实时定量RT-PCR法检测TGF-β_1诱导瘢痕疙瘩成纤维细胞中PAI-1 mRNA表达 |
| |
| 引用本文： | 何淑芳,杨林,黄维娟,杨雁,周伏圣,方巧云,张安平,杨森,张学军.应用SYBR荧光实时定量RT-PCR法检测TGF-β_1诱导瘢痕疙瘩成纤维细胞中PAI-1 mRNA表达[J].中国药理学通报,2009,25(1). |
| |
| 作者姓名： | 何淑芳 杨林 黄维娟 杨雁 周伏圣 方巧云 张安平 杨森 张学军 |
| |
| 作者单位： | [1]安徽医科大学临床药理研究所 [2]安徽医科大学皮肤病研究所、安徽医科大学第一附属医院皮肤性病科 [3]教育部“重要遗传病基因资源利用”重点实验室（省部共建）,安徽合肥230032 |
| |
| 摘 要： | 目的应用SYBR荧光实时定量RT-PCR法检测转化生长因子-β1(transforming growth factor beta1,TGF-β1)诱导瘢痕疙瘩成纤维细胞(keloid fibroblasts,KFs)中纤溶酶原激活物抑制剂-1(plasminogen activator inhibitor1,PAI-1)mRNA的表达。方法体外分离培养KFs,应用不同浓度(1.25~20 pmol.L-1)TGF-β1刺激KFs 3 h或TGF-β1(10 pmol.L-1)刺激KFs不同时间(0.5~6 h),采用SYBR Green I荧光实时定量RT-PCR法检测,以β-actin基因作为内参,计算各组PAI-1 mRNA的相对表达量。结果与空白对照组相比,TGF-β1能明显诱导KFs中PAI-1 mRNA的表达,10、20pmol.L-1浓度组表达比值分别增至4.19及4.44倍(P<0.01);TGF-β1(10 pmol.L-1)的1、2 h时间组表达比值分别增至2.29及2.41倍(P<0.05),3、6 h时间组分别增至4.19及5.83倍(P<0.01)。提示,TGF-β1诱导KFs中PAI-1mRNA表达的最适浓度为10 pmol.L-1、最适时间为3 h。结论利用SYBR荧光实时定量RT-PCR法检测TGF-β1诱导KFs中PAI-1 mRNA的表达,为进一步研究瘢痕疙瘩中TGF-β1信号通路的靶基因调控机制,以及开发治疗瘢痕疙瘩的新药提供了基础。
|
| 关 键 词： | 瘢痕疙瘩 转化生长因子-β1 纤溶酶原激活物抑制剂-1 荧光实时定量RT-PCR |
| 本文献已被 维普 等数据库收录！ |
|
