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口蹄疫病毒非结构蛋白2C基因主要表位区的表达及活性检测
引用本文:付元芳,卢曾军,田美娜,张小丽,刘在新,才学鹏.口蹄疫病毒非结构蛋白2C基因主要表位区的表达及活性检测[J].畜牧兽医学报,2008,39(9).
作者姓名:付元芳  卢曾军  田美娜  张小丽  刘在新  才学鹏
作者单位:1. 中国农业科学院兰州兽医研究所,家畜疫病病原生物学国家重点实验室,国家口蹄疫参考实验室,兰州,730046;甘肃农业大学动物医学院,兰州,730070
2. 中国农业科学院兰州兽医研究所,家畜疫病病原生物学国家重点实验室,国家口蹄疫参考实验室,兰州,730046;
基金项目:国家科技支撑计划,国家重点基础研究发展计划(973计划) 
摘    要:根据测定的口蹄疫病毒(FMDV)2C基因序列,设计了一对特异性的表达引物,用于扩增2C基因5′-端174bp和3′-端279 bp连接片段,该区含有较丰富的B细胞表位编码序列。扩增片段通过NcoⅠ和SalⅠ酶切位点插入表达载体pET-30a。序列测定表明,目的基因片段连接正确,按正确的读码框插入表达载体中。重组表达质粒转化BL21(DE3)pLys,经IPTG诱导表达目的蛋白。表达产物经SDS-PAGE和Western Blotting检测表明,2C基因主要表位区成功地在大肠杆菌表达,表达产物为约23 ku的融合蛋白,能够与FMDV感染动物血清发生特异性反应,而不与健康和灭活疫苗免疫动物血清反应。该研究为建立鉴别FMDV自然感染动物和灭活疫苗免疫动物的酶联免疫转印(EITB)方法提供了所需的材料。

关 键 词:口蹄疫病毒  非结构蛋白  2C基因  表达

Expression of Major B-cell Epitopes within 2C Non-structural Protein of FMDV and Its Bioactivity
FU Yuan-fang,LU Zeng-jun,TIAN Mei-na,ZHANG Xiao-li,LIU Zai-xin,CAI Xue-peng.Expression of Major B-cell Epitopes within 2C Non-structural Protein of FMDV and Its Bioactivity[J].Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica,2008,39(9).
Authors:FU Yuan-fang  LU Zeng-jun  TIAN Mei-na  ZHANG Xiao-li  LIU Zai-xin  CAI Xue-peng
Abstract:
Keywords:
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