小鼠蛛网膜下腔出血后胰岛素与PI-3 K／AKT信号通路的关系

观察胰岛素在小鼠蛛网膜下腔出血后神经元凋亡作用的影响，并进一步探讨其引起该作用的分子机制。健康雄性昆明小鼠，体质量28～32 g，清洁级（SPF），70只，随机分为三组：假手术组（Sham组），蛛网膜下腔出血＋生理盐水组（SAH组），蛛网膜下腔出血＋胰岛素组（Ins组），蛛网膜下腔出血＋胰岛素＋PD98059抑制剂组（PD组）。检测方法：（1）神经功能学检测，观察记录小鼠的精神状态、部分感觉和运动能力；（2）HE染色观察小鼠顶叶皮质神经元的形态学改变；（3）RT-PCR检测p-AKT、p-ERK的mRNA水平表达情况；（4）Western blot检测p-AKT、p-ERK的蛋白水平表达情况。结果表明：（1）神经功能学检测：与对照组比较，小鼠SAH后感觉和运动能力呈现不同程度障碍，综合得分明显下降；与SAH组比较，Ins组感觉和运动能力相对较好，综合得分有所上升。（2）HE 染色观察：Sham组小鼠神经元排列相对整齐，形态较完整，核质均匀，核仁清晰；SAH组小鼠神经元损伤较重，部分细胞肿胀，排列紊乱，细胞周间隙增宽，部分细胞核固缩深染。（3）RT-PCR结果显示：与Sham组比较，SAH后6h p-AKT 有所增加，同时p-ERK增加，与SAH组比较，Ins组p-AKT增加更显著，且p-AKT相对增加，与Ins组比较，PD组p-AKT明显减少，p-ERK明显减少，且与SAH组比较亦有统计学意义。（4）Western Blot结果显示p-AKT、p-ERK蛋白水平变化与mRNA水平一致。胰岛素可通过PI3 K-Akt信号转导途径明显抑制小鼠蛛网膜下腔出血后神经元的凋亡，其中Akt激活以及ERK的增加是胰岛素上述抗凋亡效应的关键环节。