运用血清药理学初步探讨毛蕊异黄酮苷的血管新生作用＊

目的 首次运用血清药理学方法,并借助体外细胞实验,初步探讨毛蕊异黄酮苷在血管新生方面的作用,为后期深入研究该物质诱导内皮祖细胞（EPCs）参与脑缺血后血管再生修复机制提供重要帮助。方法 健康雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠随机分为两组：一组大鼠预先实施假手术并作为空白血清供体,采用生理盐水灌胃;另一组大鼠预先实施右侧大脑中动脉阻塞再灌注手术以复制缺血性脑卒中疾病模型,并将造模成功动物作为含药血清供体,术后按照50mg/kg?bw的剂量灌胃毛蕊异黄酮苷溶液。各组动物每天早晚各给药1次,连续3天,末次给药1 h后腹主动脉采血。配置不同血清含量（5%、10%、15%）的培养基并对大鼠骨髓来源的内皮祖细胞进行培养,观察不同含药血清对EPCs形态数量的影响,进而选择适宜的含药血清,借助Transwell小室和Matrigel分别考察内皮祖细胞的迁移能力和形成管腔的能力的变化,并采用聚合酶联免疫反应（ELISA）对血清中血管内皮生长因子（VEGF）、基质细胞衍生因子1（SDF-1）、粒细胞集落刺激因子（G-CSF）、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）以及促红细胞生成素（EPO）含量进行检测。结果 5%和10%含药血清均能促进内皮祖细胞增值且对细胞形态无影响;15%含药血清使细胞形态改变,生长受到显著抑制。10%含药血清能够显著促进内皮祖细胞的迁移作用和形成管腔的能力（P < 0.01）。ELISA结果显示,含药血清中内皮祖细胞动员因子（VEGF、SDF-1、G-CSF、GM-CSF、EPO）含量与空白血清中的各参数相比均显著升高（P < 0.01）。结论 体外实验初步表明,毛蕊异黄酮苷吸收入血后,能够调动多种内皮祖细胞动员因子进入血循环,这些物质对激活内皮祖细胞参与机体脑缺血后的血管再生修复过程起到非常关键的作用。

Preliminarily Discussion on the Angiogenesis Effect of Calycosin-7-glucoside by Using Serum Pharmacology