| 七鳃鳗PHB2的真核表达与亚细胞定位 |
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| 引用本文： | 李庆伟,李铁松,王颖,刘欣.七鳃鳗PHB2的真核表达与亚细胞定位[J].辽宁师范大学学报(自然科学版),2015(1). |
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| 作者姓名： | 李庆伟 李铁松 王颖 刘欣 |
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| 作者单位： | 辽宁师范大学生命科学学院，辽宁大连 116081; 辽宁师范大学七鳃鳗研究中心，辽宁大连 116081 |
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| 基金项目： | 高等学校博士学科点专项科研基金项目(20102136120002)；大连市科学技术基金项目 |
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| 摘 要： | 以东北七鳃鳗心肌总RNA 反转录得到的cDNA为模板，PCR扩增 PHB2基因全长CDS区，并将其定向克隆至真核表达载体 pEGFP‐N1上，构建真核重组载体pEGFP‐N1‐Lm‐PHB2．提取重组质粒，去除内毒素，利用脂质体介导的方法转染CHL、HeLa和MCF‐7细胞，通过Western Blot检测转染后 Lm‐PHB2是否表达，Confocal观察EGFP融合蛋白在细胞中的表达及亚细胞定位．结果表明：PCR扩增片段与预期结果相符，双酶切和测序证明真核表达载体构建成功；Western Blot检测到Lm‐PHB2蛋白条带，Confocal观察到绿色荧光蛋白GFP ，证明真核重组载体成功表达；Lm‐PHB2蛋白主要定位在CHL细胞的细胞核，少量存在于基质和线粒体中，而在 HeLa和MCF‐7细胞中，Lm‐PHB2蛋白集中定位在细胞核中．本研究为七鳃鳗Lm‐PHB2的功能研究奠定了重要基础．
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| 关 键 词： | 七鳃鳗 PHB2 真核表达 亚细胞定位 |
Eukaryotic expression and cellular localization of lamprey PHB2 |
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| LI Qingwei,LI Tiesong,WANG Ying,LIU Xin.Eukaryotic expression and cellular localization of lamprey PHB2[J].Journal of Liaoning Normal University(Natural Science Edition),2015(1). |
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| Authors: | LI Qingwei LI Tiesong WANG Ying LIU Xin |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | lamprey PHB2 eukaryotic expression cellular localization |
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