微小隐孢子虫CPl5基因高效真核表达载体的构建及其在Hela细胞中的表达 |
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引用本文: | 何宏轩,张西臣,欧阳红生,尹继刚,李建华,杨举.微小隐孢子虫CPl5基因高效真核表达载体的构建及其在Hela细胞中的表达[J].中国免疫学杂志,2003,19(4):240-242. |
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作者姓名: | 何宏轩 张西臣 欧阳红生 尹继刚 李建华 杨举 |
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作者单位: | [1]河南职业技术师范学院动物科学系,新乡453003 [2]解放军军需大学动物科技系预防兽医学教研室,长春130062 |
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摘 要: | 目的:构建隐孢子虫CP15真核表达载体pCB3.1—15,观察其在Hela细胞中的表达。方法:用BglⅡ从pMD18-T-15中酶切得到CP15基因,将其插入真核表达载体pCR3.1( )的BamH I位点,构建CP15真核表达载体pCR3.1—15,脂质体介导法将其转染Hela细胞,并用G18加压筛选,用RT—PCR方法检测外源CP15基因的转录,用ELISA法和间接免疫荧光法检测其活性。结果:酶切鉴定表明已成功构建了重组真核表达载体pCR3.1-15;外源CP15基因能在转染细胞中有效转录;ELISA法和间接免疫荧光法实验结果表明表达产物具有良好的生物活性。结论:构建的pCR3.1—15真核表达载体在Hela细胞中具有良好的表达活性。
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关 键 词: | 微小隐孢子虫 CPl5基因 真核表达载体 构建 |
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