羊栖菜多糖通过调控miR-29b-5p/AQP9表达对过氧化氢诱导的星形胶质细胞氧化损伤的影响及机制 |
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引用本文: | 廖忠正,贝筝,俞容,吴小昙,杨国正.羊栖菜多糖通过调控miR-29b-5p/AQP9表达对过氧化氢诱导的星形胶质细胞氧化损伤的影响及机制[J].中国老年学杂志,2022(1). |
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作者姓名: | 廖忠正 贝筝 俞容 吴小昙 杨国正 |
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作者单位: | ;1.海南省干部疗养院(海南省老年病医院)神经内科;2.海南省人民医院神经内科 |
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摘 要: | 目的探讨羊栖菜多糖(SFPS)对过氧化氢(H2O2)引起星形胶质细胞氧化损伤的影响及作用机制。方法用200μmol/L H2O2处理细胞24 h作为H2O2组,以正常培养细胞作为对照(Con)组;分别用15 mg/L、30 mg/L、60 mg/L的SFPS培养液预处理24 h后用200μmol/L H2O2诱导处理24 h,分别记为H2O2+SFPS-L组、H2O2+SFPS-M组、H2O2+SFPS-H组。将miR-NC、miR-29b-5p转染至星形胶质细胞后用200μmol/L H2O2再诱导处理24 h,记为H2O2+miR-NC组、H2O2+miR-29b-5p组;将anti-miR-NC、anti-miR-29b-5p转染至星形胶质细胞后用60 mg/L的SFPS培养液处理24 h后再用200μmol/L H2O2诱导处理24 h,分别记为H2O2+SFPS+anti-miR-NC组、H2O2+SFPS+anti-miR-29b-5p组。丙二醛(MDA)试剂盒、超氧化物歧化酶(SOD)活性检测试剂盒、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)试剂盒分别检测MDA含量、SOD、GSH-Px活性;Western印迹检测水通道蛋白(AQP)9水平;流式细胞术检测细胞凋亡;实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-29b-5p和AQP9 mRNA表达水平;荧光素酶报告实验检测miR-29b-5p和AQP9的靶向关系。结果与Con组相比,H2O2组星形胶质细胞中MDA水平显著升高,SOD、GSH-Px活性显著降低(均P<0.05);与H2O2组相比,不同浓度SFPS组星形胶质细胞中MDA含量逐渐降低,SOD、GSH-Px活性显著升高,呈浓度依赖性(均P<0.05)。与Con组相比,H2O2组星形胶质细胞中Bcl-2表达水平显著降低,Bax、酶切caspase-3表达水平及细胞凋亡率均显著升高(均P<0.05);与H2O2组相比,不同浓度SFPS组星形胶质细胞中Bcl-2表达水平显著升高,Bax、酶切caspase-3表达水平及细胞凋亡率均显著降低,且均呈浓度依赖性(均P<0.05),与Con组相比,H2O2组星形胶质细胞中miR-29b-5p表达水平显著降低,AQP9 mRNA和蛋白表达水平均显著升高(均P<0.05);与H2O2组相比,不同浓度SFPS糖组星形胶质细胞中miR-29b-5p表达水平显著升高,AQP9 mRNA和蛋白表达水平均显著降低,且均呈浓度依赖性(均P<0.05)。miR-29b-5p组荧光素酶活性显著低于miR-NC组(P<0.05)。相较于miR-NC组AQP9蛋白表达水平,miR-29b-5p组显著降低;相较于anti-miR-NC组AQP9蛋白表达水平,anti-miR-29b-5p组显著升高(均P<0.05)。与H2O2+miR-NC组相比,H2O2+miR-29b-5p组星形胶质细胞中miR-29b-5p表达水平显著升高,AQP9表达水平显著降低,MDA水平显著降低,SOD、GSH-Px活性显著升高,Bcl-2水平显著升高,Bax水平和细胞凋亡率显著降低(均P<0.05),与H2O2组相比,H2O2+SFPS组星形胶质细胞中miR-29b-5p水平显著升高,AQP9水平显著降低,MDA水平显著降低,SOD、GSH-Px活性显著升高,Bcl-2水平显著升高,Bax水平及细胞凋亡率显著降低(P<0.05);与H2O2+SFPS+anti-miR-NC组相比,H2O2+SFPS+anti-miR-29b-5p组星形胶质细胞中miR-29b-5p水平显著降低,AQP9水平显著升高,MDA水平显著升高,SOD、GSH-Px活性显著降低,Bcl-2水平显著降低,Bax水平及细胞凋亡率显著升高(均P<0.05)。结论SFPS可抑制H2O2诱导的星形胶质细胞氧化应激和凋亡,保护H2O2引起的星形胶质细胞氧化损伤,其机制可能与miR-29b-5p和AQP9有关。
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关 键 词: | 羊栖菜多糖 miR-29b-5p AQP9 星形胶质细胞 过氧化氢 氧化损伤 |
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