| 鼠疫菌重要调控子蛋白的表达纯化及DNA结合活性分析 |
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| 引用本文： | 罗张,高鹤,张义全,王丽,谭亚芳,郭兆彪,杨瑞馥,周冬生.鼠疫菌重要调控子蛋白的表达纯化及DNA结合活性分析[J].生物技术通讯,2011,22(4):468-473. |
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| 作者姓名： | 罗张 高鹤 张义全 王丽 谭亚芳 郭兆彪 杨瑞馥 周冬生 |
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| 作者单位： | 1. 军事医学科学院,微生物流行病研究所,病原微生物生物安全国家重点实验室,北京,100071
2. 中国疾病预防控制中心,传染病预防控制所,传染病预防控制国家重点实验室,北京,102206 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，国家重点基础研究发展计划 |
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| 摘 要： | 目的:利用大肠杆菌BL21(λDE3)的表达系统,表达7个有活性的、与鼠疫耶尔森菌(鼠疫菌)传播及致病密切相关的调控子蛋白,并对这些蛋白与DNA的结合活性进行分析,为构建鼠疫菌毒力基因转录调控网络建立分子生化实验平台。方法:通过分子克隆技术构建鼠疫菌调控子蛋白的表达菌株,所得菌株经IPTG诱导后能分别表达鼠疫菌CRP、Fur、PhoP、OxyR、OmpR、RcsB和RovA带His标签的融合蛋白;对这些蛋白与DNA的结合基序进行生物信息学预测;通过体外凝胶迁移实验验证上述蛋白与靶DNA的结合活性。结果:表达了7种有活性的鼠疫菌调控子蛋白,这些蛋白与靶基因启动子区具有体外结合活性。结论:表达的7种调控子蛋白在鼠疫菌的传播致病中有重要作用,这些调控子蛋白与DNA体外结合实验平台的建立,是构建鼠疫菌毒力基因转录调控网络的基础。
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| 关 键 词： | 鼠疫耶尔森菌 调控蛋白 DNA结合活性 |
Expression and Purification of Important Regulatory Proteins of Yersinia pestis and Characterization of Their DNA-Binding Activity |
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| LUO Zhang,GAO He,ZHANG Yi-Quan,WANG Li,TAN Ya-Fang,GUO Zhao-Biao,YANG Rui-Fu,ZHOU Dong-Sheng.Expression and Purification of Important Regulatory Proteins of Yersinia pestis and Characterization of Their DNA-Binding Activity[J].Letters in Biotechnology,2011,22(4):468-473. |
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| Authors: | LUO Zhang GAO He ZHANG Yi-Quan WANG Li TAN Ya-Fang GUO Zhao-Biao YANG Rui-Fu ZHOU Dong-Sheng |
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| Affiliation: | LUO Zhang1,GAO He2,ZHANG Yi-Quan1,WANG Li1,TAN Ya-Fang1,GUO Zhao-Biao1,YANG Rui-Fu1,ZHOU Dong-Sheng1 1.State Key Laboratory of Pathogen and Biosecurity,Beijing Institute of Microbiology and Epidemiology,Beijing 100071,2.State Key Laboratory for Infectious Disease Prevention and Control,National Institute for Communicable Disease Control and Prevention,Chinese Center for Disease Control and Prevention,Beijing 102206,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Yersinia pestis regulatory protein DNA binding activity |
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