人胸腺素α原cDNA的克隆及在大肠杆菌中的表达 |
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引用本文: | 张符光,刘佃辛,宋农,王新为,张兆山,马清钧.人胸腺素α原cDNA的克隆及在大肠杆菌中的表达[J].中国生物化学与分子生物学报,1996,12(4):386-390. |
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作者姓名: | 张符光 刘佃辛 宋农 王新为 张兆山 马清钧 |
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作者单位: | 军事医学科学院卫生学环境医学研究所,中国人民解放军总后勤部分子遗传学实验室 |
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基金项目: | 总后勤部分子遗传学实验室基金 |
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摘 要: | 采用基因工程方法制取人胸腺素α原获得成功。用20ug/ml植物血球凝集素(PHA)和500U/ml重组人白细胞介素2(IL-2)联合刺激人胎儿胸腺细胞,从中提取总RNA,经反转录PCR获得了人胸腺素α原cDNA;将之克隆入pUC19中,序列测定表明与已报道序列一致,进一步将之亚克隆入原核表达载体pBV220,转化大肠杆菌DH5a.观察到在不改变氨基酸编码的前提下,增加胸腺素a原上游引物中A、T含量,可以明显提高胸腺素α原的表达量,同时,不同培养基对它的表达也有影响。胸腺素α原在大肠杆菌中以可溶形式表达,不需复性。初步活性测定显示,它可明显刺激人外周血淋巴细胞E-玫瑰花结形成率。重组人胸腺素α原在大肠杆菌中表达,为其临床应用及基础研究奠定了基础。
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关 键 词: | 人胸腺素α原 原核表达 E-玫瑰花环 |
收稿时间: | 1996-08-20 |
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