microRNA-22-3p低表达上调幼年哮喘气道重塑大鼠的NK1R表达

【摘要】 目的 探讨幼年哮喘气道重塑大鼠的microRNA-22-3p（miR-22-3p）表达水平和神经激肽受体1（NK1R）表达水平的相关性。 方法 将48只Wistar大鼠分为对照组、模型组、模型+mimic组、模型+mimic NC组、模型+inhibitor组、模型+inhibitor NC组。对照组注射生理盐水并吸入空气；模型组应用卵白蛋白(OVA)雾化吸入法建立哮喘大鼠模型；模型+mimic组、模型+mimic NC组、模型+inhibitor组、模型+inhibitor NC组，在大鼠每次激发前1 h内分别尾静脉注射1 mL的mimic、mimic NC、inhibitor、inhibitor NC。H&E染色法观察小鼠气道重塑变化，RT-qPCR检测miR-22-3p的水平变化。荧光素酶基因报告检测方法在大鼠气道平滑肌细胞RASMCs中验证miR-22-3p靶向NK1R。使用Western blot 和免疫组织化学法检测NK1R的表达水平。结果 与对照组比较，模型组发生明显的气道重塑现象，且气道组织中miR-22-3p水平降低（P＜0.05）。在RASMCs细胞中，NK1R的3′UTR和miR-22-3p的直接结合，导致荧光素酶活性强度降低（P＜0.05）。与对照组相比，模型组的NK1R的mRNA和蛋白的表达水平明显上调（P＜0.01）。与模型+mimic NC组比较，模型+mimic组 miR-22-3p的水平上调，而NK1R的表达下调（均P＜0.05）。与模型+inhibitor NC组比较，模型+ inhibitor组miR-22-3p的水平下调，而NK1R水平上调（均P＜0.05）。结论 哮喘诱发大鼠气道NK1R的表达增加，miR-22-3p直接靶向调节抑制哮喘大鼠气道重塑中NK1R的表达水平，下调miR-22-3p解除对NK1R的抑制从而上调NK1R水平。