c-FLIP-L影响乳腺癌MDA-MB-231细胞对TRAIL致凋亡作用的敏感性

目的：观察c-FLIP-L对TRAIL诱导乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡的影响及其具体机制。方法：构建靶向c-FLIP-L 的 siRNA 质粒，转染乳腺癌MDA-MB-231细胞， RT-PCR、Weston blotting验证基因抑制效果。实验分空白对照组、TRAIL组、c-FLIP-L siRNA组和c-FLIP-L siRNA+TRAIL组共4组，MTT法检测各组MDA-MB-231细胞的增殖情况，流式细胞术检测MDA-MB-231细胞凋亡率，Transwell实验检测MDA-MB-231细胞侵袭能力，RT-PCR 、Western blotting检测MDA-MB-231细胞中c-FLIP-L、caspase-3、caspase-8、MMP-2、MMP-9的表达。结果：靶向c-FLIP-L的 siRNA 质粒转染至乳腺癌细胞株可有效抑制c-FLIP-L mRNA \(37.12±3.02) vs (183.21±8.31)，(174.65±10.06)；P<0.05\]及其蛋白的水平。c-FLIP-L siRNA和TRAIL联合处理MDA-MB-231细胞，与两者单独处理相比，细胞增殖抑制率显著升高\72 h时，（75.51±2.01)% vs （3375±1.60）%，（34.31±2.01）%；均P<0.05\]，凋亡率显著升高\72 h时，（76.30±4.11）% vs （38.95±214）%，（29.28±166）%；均P<0.05\]，对细胞侵袭能力的抑制也显著增强。c-FLIP-L siRNA和TRAIL联合处理后，与两者单独处理相比，乳腺癌细胞中casepase-3、casepase-8的表达显著增强，而MMP-2、MMP-9的表达明显减弱。结论：抑制c-FLIP-L表达能够增强MDA-MB-231细胞对TRAIL的敏感性，从而提高诱导肿瘤细胞凋亡的能力，其机制可能与caspase-3、caspase-8的表达上调和MMP-2、MMP-9的表达下调有关。