五神汤化学成分鉴定及京尼平苷酸、秦皮甲素、咖啡酸、木犀草苷、β-蜕皮甾酮和毛蕊花糖苷定量检测

目的 采用超高效液相色谱串联四极杆静电场轨道阱质谱法（UPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS/MS）对五神汤中的化学成分进行鉴定，进而对五神汤中京尼平苷酸、秦皮甲素、咖啡酸、木犀草苷、β-蜕皮甾酮和毛蕊花糖苷 6种成分进行含量测定。方法 UPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS/MS 法鉴定五神汤中的化学成分，采用 ACQUIFY UPLCTMBEH C₁₈ 色谱柱（100 mm×2.1 mm，1.7 μm）进行分离，以0.1%甲酸-乙腈为流动相进行梯度洗脱，检测波长为 254 nm，柱温30 ℃；电喷雾离子源（ESI）全扫模式；根据一级质谱中的分子离子，推测化合物的相对分子质量和元素组成；再利用二级质谱信息，与对照品及文献报道中化合物信息库进行比对，推测五神汤的体外化学成分。HPLC 法检测五神汤中京尼平苷酸、秦皮甲素、咖啡酸、木犀草苷、β-蜕皮甾酮和毛蕊花糖苷，Aglient Eclipse XDB-C₁₈色谱柱（150 mm×4.6 mm，5 mm），流动相为0.1%磷酸水（A）-乙腈（B），梯度洗脱，检测波长254 nm，体积流量1.0 mL·min^-1，柱温30 ℃，进样量10 μL。结果 共检测到五神汤中的71种化学成分，主要包括黄酮类、酚酸类、三萜皂苷类以及香豆素类；6种成分在浓度范围内线性关系良好，平均加样回收率为89.6%～93.0%。京尼平苷酸、秦皮甲素、咖啡酸、木犀草苷、β-蜕皮甾酮和毛蕊花糖苷在10批样品中的平均质量浓度依次为 2.92、2.48、1.72、1.38、2.08、1.77 mg·g^-1。结论 建立的 UPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS/MS、HPLC法可用于五神汤化学成分的鉴定和含量测定。