马达加斯加龙树实时荧光定量PCR鉴定方法的研究

目的]通过设计特异性引物与荧光探针，建立马达加斯加龙树（Didierea madagascariensis）实时荧光定量PCR鉴定方法。方法]提取26份龙树科植物基因组，并用内源基因检测DNA质量；根据GenBank中已发表的马达加斯加龙树的PEPC基因序列，设计特异性引物与荧光探针，通过检测26份供试样本，检测该方法的特异性；将样品DNA进行10倍梯度稀释，以检测实时荧光定量PCR方法的灵敏度。结果]只有3份马达加斯加龙树样本出现典型的扩增曲线，其他23份龙树科植物无典型的扩增曲线；核酸原液与10^-1～10^-4倍稀释液样本均能够得到典型扩增曲线，标准曲线的决定系数（R²）为0.995,检测限量为5.2×10^-3 ng/μL。结论]该方法特异性强、灵敏度高，可有效地应用于马达加斯加龙树的鉴定。