中华蜜蜂气味受体AcerOr2基因最佳干扰片段的筛选 |
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引用本文: | 郭丽娜,赵慧婷,任有蛇,徐兵,姜玉锁.中华蜜蜂气味受体AcerOr2基因最佳干扰片段的筛选[J].山西农业科学,2020,48(6). |
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作者姓名: | 郭丽娜 赵慧婷 任有蛇 徐兵 姜玉锁 |
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作者单位: | 山西农业大学动物科技学院,山西太谷030801;山西农业大学生命科学学院,山西太谷030801;山西农业大学工学院,山西太谷030801 |
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基金项目: | 优秀博士来晋奖励项目;科技创新项目;科技创新项目 |
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摘 要: | 为了筛选出中华蜜蜂气味受体基因AcerOr2最佳干扰效率的序列,以中华蜜蜂气味受体AcerOr2基因为靶标,分别选取3个片段AcerOr2-1(411 bp)、AcerOr2-2(205 bp)和AcerOr2-3(471 bp),并构建相应的dsRNA表达载体,获取dsRNA后进行RNAi试验,通过qPCR和Western从mRNA水平和蛋白水平检测干扰效率。mRNA结果显示,饲喂3个不同的片段AcerOr2-1(411 bp)、AcerOr2-2(205 bp)和AcerOr2-3(471 bp)对AcerOr2表达量均会产生抑制作用,抑制率分别为69.72%±0.49%、47.26%±0.25%、73.17%±0.97%,抑制率最佳的是471 bp的dsRNA AcerOr2-3。Western Blot结果显示,饲喂3个大小不同的干扰片段后AcerOr2蛋白的表达量均受到显著抑制。试验成功构建AcerOr2基因干扰载体,最终确定471 bp的dsRNA AcerOr2-3为最佳干扰片段,证实其能有效抑制目的基因mRNA和蛋白的表达。研究结果可为进一步应用RNAi技术研究该基因的体内外功能奠定基础。
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关 键 词: | 中华蜜蜂 AcerOr2基因 RNA干扰 |
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