| 稳定表达人MCPH1基因shRNA的宫颈癌Caski细胞系的建立 |
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| 引用本文： | 黄秀凝,袁成福,程莉,卜友泉,易发平,刘革力,汪长东,宋方洲.稳定表达人MCPH1基因shRNA的宫颈癌Caski细胞系的建立[J].粉末涂料与涂装,2009,22(11). |
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| 作者姓名： | 黄秀凝 袁成福 程莉 卜友泉 易发平 刘革力 汪长东 宋方洲 |
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| 作者单位： | 重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心生物化学与分子生物学教研室,重庆,400016 |
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| 摘 要： | 目的建立稳定表达人MCPH1基因shRNA的宫颈癌Caski细胞系,并观察shRNA对Caski细胞中MCPH1基因表达的影响。方法将人MCPH1基因RNA干扰双链DNA片段重组到逆转录病毒质粒pSUPERRetro中,构建携带人MCPH1基因RNA干扰的逆转录病毒载体pSUPER-shRNA-MCPH1,经PT67细胞包装后,产生重组逆转录病毒,感染宫颈癌细胞株Caski,经puromycin筛选稳定的细胞克隆,实时荧光定量PCR和Westernblot法检测细胞中MCPH1基因mRNA的转录水平和蛋白的表达水平。结果重组逆转录病毒质粒经测序鉴定正确;逆转录病毒感染Caski细胞后可筛选出稳定的细胞克隆;pSUPER-shRNA-MCPH1组细胞中MCPH1基因mRNA的转录水平及蛋白的表达水平明显低于阴性对照组及正常对照组。结论已成功建立了稳定表达人MCPH1基因shRNA的Caski细胞系,shRNA能明显抑制MCPH1基因的表达,为进一步研究MCPH1在宫颈癌中的作用奠定了基础。
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| 关 键 词： | MCPH1基因 shRNA 逆转录病毒载体 宫颈癌 |
Establishment of Cervical Cancer Caski Cell Line for Stable Expression of shRNA Targeting Human MCPH1 Gene |
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| Keywords: | shRNA MCPH1 gene shBNA Retrovims vector Cervical cancer |
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