2型猪链球菌MocR家族转录调控因子SSU0562基因敲除突变体的构建及毒力分析 |
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引用本文: | 李娟,刘丽娜,胡丹,朱旭辉,龚秀芳,赵琳,钟璟皓,潘秀珍,王长军.2型猪链球菌MocR家族转录调控因子SSU0562基因敲除突变体的构建及毒力分析[J].中国生物工程杂志,2015,35(7):8-14. |
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作者姓名: | 李娟 刘丽娜 胡丹 朱旭辉 龚秀芳 赵琳 钟璟皓 潘秀珍 王长军 |
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作者单位: | 1. 南京军区军事医学研究所 南京 210002;
2. 贵阳医学院生物与工程学院 贵阳 550004 |
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基金项目: | 国家自然科学基金(81471920,31170124,81172794),南京军区医学创新课题(ZX39),江苏省自然科学青年基金(BK20140096)资助项目 |
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摘 要: | 目的:构建2型猪链球菌强毒株05ZYH33中MocR家族转录调控因子SSU0562基因敲除的突变株,探索SSU0562基因缺失对细菌基本生物学特性和毒力的影响。方法:构建左右两侧为SSU0562基因上下游的同源序列,中间部分为壮观霉素抗性基因(Spcr)的基因敲除质粒,通过同源重组的方法筛选SSU0562基因敲除突变株Δ0562。对突变株与野生株的基本生物学特性进行系统的比较分析,并且将小鼠作为动物感染的模型来研究突变株的毒力。结果:组合PCR的分析及基因测序结果均表明Spcr完全取代了S.suis2中SSU0562基因位点,表明基因敲除突变体Δ0562构建成功,反转录PCR(RT-PCR)证实了突变株Δ0562中SSU0562基因在转录水平的缺失;在溶血活性、生长速率及对小鼠的致病力方面,突变株Δ0562与野生株05ZYH33相比均无显著差别,然而革兰染色实验显示突变株Δ0562的成链能力明显减弱。结论:猪链球菌强毒株05ZYH33的毒力并未因SSU0562基因的缺失而发生显著性改变,表明SSU0562基因并非猪链球菌的毒力决定因子,但很有可能参与猪链球菌成链能力的调控。
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关 键 词: | 2型猪链球菌 MocR SSU0562 基因敲除毒力 |
收稿时间: | 2014-12-25 |
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