pBV-IL-6重组质粒构建及其在E.coli中的高效表达 |
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引用本文: | 强新,袁健中,王斌,邵济钧.pBV-IL-6重组质粒构建及其在E.coli中的高效表达[J].青岛大学医学院学报,1998(3). |
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作者姓名: | 强新 袁健中 王斌 邵济钧 |
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作者单位: | 青岛医学院微生物学教研室 |
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摘 要: | 目的构建人IL-6重组质粒(rhIL-6),并使其在E.coli中高效表达。②方法经计算机分析设计,人工合成3条寡核苷酸引物,通过定点诱变并优化起始区,应用PCR扩增及重组DNA技术,构建重组质粒pBV-IL-6,并转化至E.coli宿主菌DH5α中诱导表达,对产物进行纯化和复性,MTT法检测生物活性。③结果获得2种rhIL-6高效表达的E.coliDH5α/pBV-IL-6工程菌,一种表达20.8kuIL-6全蛋白;另一种表达16.8ku,N端缺失25个氨基酸IL-6蛋白。薄层密度扫描分析表达产率,前者为28.3%,后者为33.4%,且均具有生物学活性。④结论rhIL-6构建成功,并获高效表达
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关 键 词: | 白细胞介素6 聚合酶链反应 细菌蛋白质 |
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