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应用气-液界面染毒技术研究柴油机尾气对16HBE细胞的毒性作用
引用本文:高峰,李园园,牛勇,宾萍,鱼涛,张荣,陈雯,郑玉新.应用气-液界面染毒技术研究柴油机尾气对16HBE细胞的毒性作用[J].劳动医学,2015,32(3):193-198.
作者姓名:高峰  李园园  牛勇  宾萍  鱼涛  张荣  陈雯  郑玉新
作者单位:1. 中山大学公共卫生学院预防医学系,广东,510080
2. 中国疾病预防控制中心职业卫生与中毒控制所,化学安全与健康重点实验室,北京100050
3. 中国疾病预防控制中心职业卫生与中毒控制所,化学安全与健康重点实验室,北京100050;河北医科大学公共卫生学院职业卫生与毒理学教研室,河北050017
基金项目:国家自然科学基金项目(编号:81130050,81472955);“十二五”国家科技支撑计划课题(编号:2014BAI12B02);中国博士后基金项目(编号:2013M540124)
摘    要:目的]应用气-液界面染毒技术探索柴油机尾气对人支气管上皮(16HBE)细胞急性毒性作用. 方法]在流速为20 mL/min,37℃的条件下,用柴油机尾气分别对生长在多孔膜上的16HBE细胞持续染毒5、10、15、20、30 min,分别使用CCK-8(Cell Counting Kit-8)检测法、乳酸脱氢酶(LDH)释放法、中性红摄入法(NRU)检测柴油机尾气对细胞存活率的影响;对细胞存活率约50%以上的染毒组用流式细胞术检测柴油机尾气对细胞凋亡率的影响;同时对每个染毒组分别设置用滤膜过滤的洁净空气作为对照组,暴露时间和检测方法均与染毒组-致. 结果]3种存活率检测方法的结果表明,染毒组与对照组相比,柴油机尾气持续染毒15 min及更长时间以后,细胞存活率降低,差异有统计学意义(P< 0.05),且呈随染毒时间延长而逐渐降低的趋势.3种方法比较表明,低流速短时间柴油机尾气对16HBE细胞的损伤作用以细胞膜损伤最为显著,其次是线粒体损伤.用柴油机尾气持续染毒10、15 min,染毒组细胞早期凋亡率、晚期凋亡及坏死率较对照组均升高,差异均有统计学意义(P< 0.05).10、15 min染毒组的晚期凋亡及坏死细胞多于早期凋亡细胞(P<0.05). 结论]气-液界面染毒技术可以应用于柴油机尾气等气溶胶有害物质的体外毒性研究;同时发现柴油机尾气导致的16HBE细胞急性毒性为细胞膜损伤、线粒体损伤及细胞凋亡.

关 键 词:柴油机尾气  气-液界面染毒技术  存活率  细胞凋亡

Acute Toxicity of Diesel Engine Exhaust on 16HBE Cells by Air-Liquid Interface Exposure Method
GAO Feng;LI Yuan-yuan;NIU Yong;BIN Ping;YU Tao;ZHANG Rong;CHEN Wen;ZHENG Yu-xin.Acute Toxicity of Diesel Engine Exhaust on 16HBE Cells by Air-Liquid Interface Exposure Method[J].Journal of Labour Medicine,2015,32(3):193-198.
Authors:GAO Feng;LI Yuan-yuan;NIU Yong;BIN Ping;YU Tao;ZHANG Rong;CHEN Wen;ZHENG Yu-xin
Affiliation:GAO Feng;LI Yuan-yuan;NIU Yong;BIN Ping;YU Tao;ZHANG Rong;CHEN Wen;ZHENG Yu-xin;Department of Preventive Medicine, School of Public Health, Sun Yat-sen University;Key Laboratory of Chemical Safety and Health, National Institute for Occupational Health and Poison Control, China Center for Disease Control and Prevention;Department of Occupational Health and Toxicology, School of Public Health, Hebei Medical University;
Abstract:
Keywords:diesel engine exhaust  air liquid interface exposure  cellular viability  apoptosis
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